ADN inductor de tumores
Se aplica comúnmente al plásmido (Ti) de la bacteria antes denominada Agrobacterium tumefaciens y ahora Rhizobium spp., que causa la formación de tumores en el cuello, raíz e incluso parte aérea de gimnospermas y dicotiledóneas. Dado que estos plásmidos son capaces de transferir ADN e integrarlo en el cromosoma de la célula vegetal anfitriona, se utilizan como vectores de ADN foráneo en la transformación genética de plantas.
biobalística
Método utilizado para introducir ADN foráneo en células vegetales, mediante bombardeo o disparos con micropartículas (microproyectiles) de oro o de tungsteno, en las que se ha hecho precipitar el ADN. Son disparados sobre los tejidos vegetales a altas velocidades, atraviesan la pared y la membrana celular y llevan al interior de la célula los genes de interés para su posterior integración en el genoma vegetal.
eficiencia de transformación
Número de células que incorporan ADN foráneo (células transformadas) en función de la cantidad de ADN añadido.
endonucleasa de restricción
Enzima capaz de degradar de forma inespecífica moléculas de ADN extrañas con la finalidad de proteger a las células de la invasión por ADN foráneo o ajeno. Reconocen un sitio específico del ADN y cortan la doble hebra en algún punto cercano (tipo I), actúan sobre secuencias cortas y palindrómicas rompiendo en el mismo lugar de reconocimiento (tipo II), o reconocen secuencias asimétricas cortas que rompen a 24-26 pb del lugar de reconocimiento (tipo III).
frecuencia de transformación
Fracción de una población que incorpora ADN foráneo. Se expresa como el cociente entre el número de sucesos de transformación y el número de explantos a los que se ha disparado con la pistola de genes, han sido cocultivados con Agrobacterium o sometidos a otras técnicas de transferencia de genes.
inserto
Secuencia de ADN foráneo introducida en una molécula de ADN determinada.
metilación del ADN
Proceso por el cual se añade un grupo metilo a una o más bases de una molécula de ácido nucleico, por medio de unas enzimas denominadas metiltransferasas de ADN. La metilación del ADN cumple muchas funciones, como por ejemplo poder distinguir el ADN recién sintetizado en bacterias (ya que solo una de las cadenas estará metilada), para procesos de reparación durante la replicación; protección frente a ADN foráneo (bacteriófagos, plásmidos, etc.), que no estará metilado con el mismo patrón que el ADN de la bacteria y podrá ser degradado por enzimas de restricción; y, en muchos eucariotas, fundamentalmente plantas y animales, la represión de la transcripción génica. Las citosinas junto a guaninas son las bases más frecuentemente metiladas. También, la metilación de citosinas da lugar con mucha frecuencia a mutaciones en el ADN por desaminación de la citosina.
metilasa de modificación
Enzima que cataliza la modificación química de ciertas bases del ADN por metilación de los nucleótidos de un sitio de reconocimiento de restricción, correspondiente a sus propias enzimas de restricción. Esta enzima protege al propio ADN frente al ataque por sus propias enzimas de restricción. La metilasa de modificación M.EcoRI se ha utilizado frecuentemente para metilar ADN foráneo y protegerlo frente a la enzima de restricción EcoRI.
microinyección
Técnica de micromanipulación en la que parte de los componentes de una célula son inyectados en otra. Se utiliza para inyectar diversas formas de ADN foráneo o no, en células o núcleos u orgánulos en células. Cuando el ADN inyectado se incorpora en el genoma de la célula se transforma y se pueden obtener individuos transgénicos. También se utiliza para producir híbridos somáticos, como alternativa a la fusión de protoplastos. Se efectúa con un micromanipulador de precisión.
vector de inserción
Término aplicado fundamentalmente a fagos utilizados para clonación. Vehículo de clonación en el que el ADN foráneo o extraño se inserta sin pérdida de ningún fragmento de la secuencia del ADN original del fago.
ADN exógeno
Aquel procedente del exterior de un organismo concreto. Se trata, en general, de ADN heterólogo.