Molécula de ADN artificial producida por la unión de dos o más fragmentos de ADN que no están normalmente en proximidad física y frecuentemente son de diferentes organismos.
tecnología del ADN recombinante
bacteriófago
Bacteriófago o fago es un término general para denominar a virus aislados de bacterias; algunos autores también utilizan el término para denominar a virus que infectan a arqueas, aunque esta acepción es controvertida. Su cápsida puede ser icosaédrica, constar de cabeza-cola, ser de tipo bastoncillo (filamentosa), o de otros tipos, y sus genomas constar de ADN o ARN y contener un número muy variable de genes. Se subdividen según sus propiedades bioquímicas o morfológicas. Un tipo de fago concreto suele infectar únicamente a una gama limitada de huéspedes o anfitriones sensibles. Infectan bacterias mediante inyección de su ácido nucleico en la célula anfitriona utilizando la maquinaria biológica de la bacteria para su reproducción. Hay dos tipos: líticos (bacteriófagos virulentos) y lisogénicos (bacteriófagos temperados), según que la infección produzca un cambio en el metabolismo bacteriano que lo lleve a la producción de nuevos bacteriófagos tras la lisis celular, o que el ADN vírico se inserte en el cromosoma bacteriano y se reproduzca con él, en forma de profago, sin destruir la célula bacteriana. Algunos se utilizan en el control biológico de bacterias fitopatógenas (también en medicina frente a bacterias multirresistentes a antibióticos), como vectores de clonación para insertar ADN dentro de las bacterias y obtener como resultado bibliotecas genómicas o genotecas de ADN recombinante (uno de los fagos más utilizados para este fin es el fago λ). Las genotecas combinatorias de anticuerpos se generan mediante la técnica de despliegue en fagos filamentosos o en bacterias. Los más importantes por sus aplicaciones biotecnológicas son el bacteriófago o fago λ (lambda), el fago 29 (phi29) y el bacteriófago M13 (que ha dado derivados fagémidos), muy utilizados como vectores de clonación.
encapsidación
1. Mecanismo por el cual el ADN o el ARN viral queda protegido por una cápsida proteica formándose una nucleoproteína o virión. 2. (packaging). Reintroducción de una molécula de ADN recombinante en una partícula de un bacteriófago.
ensayo de ADN en filtro
Técnica analítica utilizada para reconocer ADN recombinante en células clonadas. Las células transformadas representan un pequeño porcentaje de la población total de células en un cultivo. El cultivo se diluye y siembra en una placa de Petri hasta que forme colonias individuales que se ponen en contacto con un disco de membrana de nitrato de celulosa, nailon, o papel (en una posición equivalente a la de las colonias), después se lisan las células y el filtro se trata para favorecer la adherencia del ADN. Al tratar la membrana con una sonda que hibride con el ADN transformado, se localizan las colonias transformadas mediante autorradiografía, o más comúnmente por anticuerpos fluorescentes.
planta editada genéticamente
La tecnología de edición de genes CRISPR/Cas9 hace posible la mejora de variedades vegetales sin la introducción de elementos foráneos. La edición de genes en plantas a menudo requiere una etapa inicial de transformación genética para introducir los elementos del sistema (ARN guía, ARNsg y proteína Cas9) y su posterior eliminación en la siguiente generación. Esto supone una limitación en especies para las que no se han desarrollado protocolos eficientes de transformación genética o con largos tiempos de generación, como algunas plantas leñosas. Actualmente, se están desarrollado métodos alternativos que no requieren transformación estable, mediante el uso de protoplastos o embriones inmaduros. También se han desarrollado sistemas de edición compuestos únicamente por proteínas o complejos ARN-proteína que permiten editar el genoma sin el uso de ADN recombinante. La tecnología CRISPR/Cas9 y Cas12 y sus variantes se está utilizando para generar plantas resistentes a estreses tanto abióticos como bióticos.
planta transgénica
Aquella cuyo genoma ha sido modificado utilizando tecnología de ADN recombinante, por lo tanto, no incluye a las plantas editadas genéticamente.
ADN híbrido
ADN bicatenario (ADNbc) artificial obtenido por apareamiento de dos hebras que presentan complementariedad total o parcial de bases.
ADN recombinado
ingeniería genética
Tecnología para inducir cambios en la constitución genética de las células sin mediar el ciclo sexual. Esta metodología es capaz de producir moléculas de ADN que contienen nuevos genes y normalmente emplea vectores, como Agrobacterium para eucariotas y plásmidos para procariotas, para transferir el ADN a un organismo receptor. La transferencia se puede realizar sin vectores mediante sistemas de electroporación o biobalística, entre otros.
manipulación génica
Formación de nuevas combinaciones (producidas fuera de la célula) de material heredable por inserción de una molécula de ácido nucleico en cualquier virus, plásmido u otro sistema vector. De esta forma se permite su incorporación a un organismo huésped, en el que no aparecen de forma natural, pero en el que dichas moléculas de ADN son capaces de reproducirse de forma continua. El proceso se puede también denominar clonación molecular o clonación de genes, pues puede propagarse y crecer en cultivo una línea de organismos genéticamente idénticos.