Diccionario

Citometría de flujo en la que se utilizan diferentes fluorocromos para marcar las células o partículas en suspensión que se analizan. Los distintos fluorocromos absorben energía luminosa de una longitud de onda específica y la reemiten a una longitud de onda más larga. Las longitudes de onda a las que el fluorocromo absorbe y emite luz se conocen como espectros de excitación y emisión del fluorocromo, respectivamente; ello le confiere diferente color o espectro de fluorescencia para su identificación específica.

Técnica de análisis celular multiparamétrico. Es una forma especializada de la microscopía de fluorescencia en la cual las células o partículas en suspensión, pasan alineadas de una en una, por delante de un haz de láser focalizado en el que se toman y cuantifican diversas mediciones relacionadas con las propiedades físicas y químicas de cada célula o partícula.

Aumento de la población en el que la tasa de crecimiento por individuo es la misma, sin importar el tamaño de la población, lo que hace que aumente cada vez más rápido conforme la población se vaya haciendo más grande, aunque finalmente se ve limitado por la escasez de recursos o la acumulación de sustancias tóxicas. En una representación gráfica lineal, suele producir una curva en forma de J. La medición de la curva de crecimiento exponencial de las bacterias en un cultivo en laboratorio se realiza por conteo, por métodos directos individuales (microscopía óptica, citometría de flujo), por métodos directos y masivos (biomasa), por métodos indirectos e individuales (conteo de colonias), o por métodos indirectos y en bloque (número más probable, turbidez, absorción de nutrientes). El crecimiento se muestra como el logaritmo del número de colonias con actividad reproductora positiva por mL, en función del tiempo de incubación.

Acrónimo del inglés. Denominación común de la tinción con 4′, 6-diamidino-2-fenilindol, polvo amarillo soluble en agua, marcador fluorescente que se une a regiones enriquecidas en adenina y timina en secuencias de ADN. Se utiliza en microscopía de fluorescencia para teñir células muertas ya que no atraviesa pasivamente la membrana celular y solo lo transportan activamente al citoplasma las células vivas. Se emplea para detección de infección por micoplasmas en cultivos celulares y para la medición del contenido nuclear y la clasificación de cromosomas en citometría de flujo, evaluación de la apoptosis, detección de ADN en núcleo y organelos en inmunofluorescencia e hibridación in situ, Ha sido muy utilizado para localizar fitoplasmas en el floema de plantas sospechosas de estar infectadas. Puede sustituir al bromuro de etidio en tinciones de ADN en geles de agarosa.

Sistema muy utilizado en biología como marcador en numerosos métodos de detección de proteínas y ácidos nucleicos. La unión no covalente biotina-avidina es muy estable. La constante de afinidad del complejo biotina-avidina es de 1015 M-1, una de las más altas conocidas (como referencia, la afinidad entre antígeno y anticuerpo suele ser de alrededor de 1012 M-1). La estreptavidina es la proteína marcadora de uso más habitual ya que es no glicosilada y muestra niveles bajos de unión inespecífica y ha sustituido a la avidina que es una glicoproteína altamente catiónica y puede producir coloración de fondo inespecífica en algunas aplicaciones, debido a sus residuos cargados positivamente y componentes de oligosacáridos. El sistema es muy utilizado y hace posible que el uso de moléculas (frecuentemente anticuerpos) o compuestos biotinilados sean revelados con estreptavidina marcada o conjugada con enzimas, oro coloidal, hierro, fluorocromos, etc. o cualquier sustancia o elemento delator. El sistema es utilizado en técnicas ELISA, citometría de flujo, inmunotransferencia, inmunohistoquímica, inmunoelectromicroscopía de decoración, adquisición de imágenes fluorescentes, sondas de ADN para hibridación Southern o in situ, o detección en general. También se usan resinas y gránulos magnéticos de estreptavidina conjugada para aislar proteínas, células y ADN, o en separación biológica.

Marcador que supone una alternativa al bromuro de etidio en electroforesis, pues es más sensible y mucho menos tóxico, pero ha sido sustituido por otros marcadores para PCR. Marca los ácidos nucleicos puros, pero adicionalmente se puede emplear en el etiquetado del ADN dentro de las células para la citometría de flujo y en la microscopía de fluorescencia, tras tratamiento previo con ARNasa, para reducir la cantidad de ARN celular.

Sigla de unidad formadora de placa o calva. Se utiliza para cuantificar el número de partículas de bacteriófagos capaces de formar calvas (placas) por unidad de volumen. Se trata de una estima de la cantidad absoluta de partículas virales, pues no contabiliza las partículas virales defectivas o las que no logran infección. Es equivalente al concepto de ufc, pero mediante citometría de flujo o RT-PCR en tiempo real cuantitativa, se pueden cuantificar de manera precisa las partículas de genoma vírico totales (funcionales y no funcionales).