Diccionario

Colorante orgánico catiónico, sintético y alcalino de triaminotrifenilmetano. Se encuentra disponible como un polvo con brillo metálico. Se utiliza para distintos fines: como indicador de pH, colorante para identificar bacterias en la tinción de Gram para distinguir entre bacterias grampositivas y gramnegativas y en medios selectivos o semiselectivos por su efecto inhibitorio de microbiota grampositiva y de algunas especies gramnegativas. También es utilizado en histología para la identificación de núcleos celulares y para medir los efectos citostáticos/citotóxicos en las líneas de células tumorales.

Bacteria que no retiene el primer reactivo de la tinción de Gram (violeta de genciana o cristal violeta) al desteñirse tras decoloración con alcohol etílico-acetona, debido a la composición de su fina pared con una capa interna de mureína, una capa intermedia de lipopolisacáridos y una externa lipoproteica. Su pared toma un color rosa o rojo claro tras la tinción posterior con safranina o, para obtener una coloración más intensa, con fucsina. La gran mayoría de bacterias fitopatógenas pertenecen a este grupo.

Bacteria que sometida a la coloración de Gram tras el primer reactivo (violeta de genciana o cristal violeta), no se destiñe tras decoloración con alcohol etílico-acetona y retiene la tinción en su espesa pared compuesta del mucopéptido polimerizado denominado mureína. Su pared queda de un color azul-violeta tras la tinción posterior con safranina o, para obtener una coloración más intensa, con fucsina.

Aquella diferencial por la que la mayoría de las especies bacterianas se clasifican en dos grandes grupos, grampositivas y gramnegativas. Un frotis de bacterias fijadas al calor en un portaobjetos, se tiñe con una solución de cristal violeta, seguida de una disolución diluida de yodo, y tras ello se lava con etanol o acetona. Las bacterias gramnegativas se decoloran completamente con el disolvente, mientras que las grampositivas retienen el colorante y aparecen de color violeta. El proceso puede usarse seguido de otra tinción con otro colorante como la safranina, que tiñe las células gramnegativas de rosa, permitiendo distinguirlas bajo observación al microscopio.