Diccionario

Enzima capaz de degradar de forma inespecífica moléculas de ADN extrañas con la finalidad de proteger a las células de la invasión por ADN foráneo o ajeno. Reconocen un sitio específico del ADN y cortan la doble hebra en algún punto cercano (tipo I), actúan sobre secuencias cortas y palindrómicas rompiendo en el mismo lugar de reconocimiento (tipo II), o reconocen secuencias asimétricas cortas que rompen a 24-26 pb del lugar de reconocimiento (tipo III).

Técnica por la que el ADN genómico o plasmídico se trocea con una endonucleasa de restricción en fragmentos de longitud variable. Los fragmentos se separan por electroforesis en gel de agarosa y se estima su tamaño. Alternativamente se transfieren a una membrana, normalmente de nitrato o éster de celulosa. Seguidamente se trata la membrana con ARN o ADN desnaturalizado, radiactivo y de secuencia complementaria al gen de interés y se procede a revelar por autorradiografía con 32P o bromuro de etidio. Si se utilizan distintas enzimas de restricción aisladas o combinadas en mezcla, puede construirse el mapa de sitios de restricción. La técnica prácticamente ha sido sustituida en la actualidad por la secuenciación.

Fragmentos complementarios de ADN de cadena simple, situados en los extremos de una molécula de ADN de cadena simple que ha sido cortada por una endonucleasa de restricción. Al ser complementarios tienden a unirse.

1. Secuencia de pares de bases reconocida por una endonucleasa de restricción. 2. Secuencia de pares de bases, epítopo o determinante antigénico, reconocido por un anticuerpo.

Mecanismo de protección de la célula bacteriana ante un ADN extraño. Se sirve de endonucleasas específicas denominadas de restricción que cortan las dos cadenas del ADN por sitios muy específicos. La célula que sintetiza la enzima de restricción normalmente está protegida contra su actuación, ya que también sintetiza una enzima de modificación que altera la estructura del ADN de los sitios habitualmente reconocidos por la endonucleasa. Si una célula con el sistema de modificación activo se infecta con un bacteriófago cuyo ADN no ha sido previamente modificado, su ADN será cortado en varios fragmentos en función del número de lugares susceptibles y finalmente será degradado por exonucleasas. En esta situación, la probabilidad de que el fago inicie una infección es varios órdenes de magnitud menor que si el ADN de fago hubiera sido modificado.