Diccionario

La cantidad o concentración mínima de sustancia que puede ser detectada con fiabilidad por un método analítico determinado. Intuitivamente, el límite de detección sería la concentración mínima obtenida a partir de la medida de una muestra (que contiene el analito) que el método analítico sería capaz de discriminar de la concentración obtenida a partir de la medida de un blanco, es decir, de una muestra sin analito presente.

La menor cantidad de un analito cuya señal puede ser distinguida de la del ruido de fondo. Cantidad o concentración mínima de sustancia que puede ser detectada con fiabilidad por un método analítico determinado.

Aquel que define el contenido de sustancias principales y contiene niveles aceptables de contaminantes. Teniendo en cuenta el contenido de la sustancia principal y las impurezas, los reactivos se dividen en: i) grado técnico: contenido de la sustancia principal en 90-99 %. Suelen ser productos de síntesis industrial; ii) grado purificado: contenido de la sustancia principal en 99-99,9 %. Tienen parámetros uniformes. Reactivo para uso general de laboratorio, generalmente para análisis cualitativo. Se pueden usar como sustratos para síntesis y sustancias auxiliares; iii) grado de laboratorio: contenido de la sustancia principal en 99,9-99,99 %. Se utilizan en laboratorios para realizar análisis cualitativos y cuantitativos de acuerdo con los problemas; iv) grado de pureza química: contenido de la sustancia principal al 99,99-99,999 %. Es el producto de más alta calidad que cumple con los requisitos de las técnicas de laboratorio especializadas. La cantidad de impurezas está por debajo del límite de detección de métodos químicos; y v) grado espectrofotométrico: contenido de la sustancia principal en 99,999-99,9999 %. Se utilizan en análisis espectrales, como cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y otros que requieren de alta precisión.

Técnica serológica que combina un sistema integral de análisis o dispositivo, basado en anticuerpos inmovilizados en una única tira de membrana que posee dos zonas (de conjugado y de captura) y permite la determinación rápida (5-15 minutos) de la presencia o ausencia de un patógeno o sus metabolitos o incluso de diversos analitos, como de dos aislados del mismo virus o de diferentes. Los dispositivos más utilizados en Fitopatología están compuestos por tiras reactivas inmunocromatográficas de nitrocelulosa o éster de celulosa. Para realizar el análisis, se añade una gota de extracto de la muestra o de una suspensión de células del microorganismo por un orificio redondo en la denominada zona de conjugado, mezclada con anticuerpos específicos del patógeno a detectar pero conjugados usualmente con nanopartículas de carbón coloreadas. Si la muestra contiene el antígeno problema, este se unirá a los anticuerpos conjugados formando un complejo que migrará a través de la membrana. Si no, migrarán separados el anticuerpo conjugado y la muestra sin antígeno, sin unirse. En la zona de captura del dispositivo (dos líneas separadas de anticuerpos) se encuentran fijados en una primera línea anticuerpos específicos frente a otro epítopo del antígeno problema. Al llegar la muestra a esta primera línea, los complejos formados por la unión del antígeno (muestra) con el conjugado quedarán retenidos y la línea se coloreará en este caso en rosa, negro o azul, según el color del delator (muestra positiva). En el caso contrario, si las muestras son negativas, aparecerá una segunda línea donde los conjugados sin fijarse al antígeno inexistente, quedarán retenidos por anticuerpos anti la especie animal utilizada en la prueba. Así pues, la aparición de dos líneas (positivo y control) indicarán la presencia del patógeno analizado y la aparición de una única línea de control indicará la ausencia del patógeno o su presencia en concentración inferior al límite de detección de la técnica y sus reactivos. Esta evaluación visual permite el análisis cualitativo y semicuantitativo. Mediante un lector especial, se pueden analizar de forma cuantitativa las tiras reactivas. Además de la rapidez de los resultados y la sencilla manipulación, los ensayos de flujo lateral tienen la ventaja de poder ser utilizadas en condiciones de campo por personal no especializado a un coste económico relativamente bajo.

Menor cantidad de objetivo o diana que se puede detectar de manera fiable. Se calcula para distintos patógenos según los detalles del documento OEPP PM 7/98 (5), “Requisitos específicos para los laboratorios que preparan la acreditación para una actividad de diagnóstico de plagas de plantas”. En el caso de virus, viroides y fitoplasmas (agentes no cultivables in vitro), se analizan al menos ocho muestras en el límite de detección establecido. Estos resultados se pueden combinar con repetibilidad/reproducibilidad y constituyen un criterio para la validación de una prueba o método analítico.