Denominación común de la técnica analítica utilizada para identificar proteínas específicas en una mezcla compleja de proteínas, como la que se presenta en extractos celulares o de tejidos vegetales. La técnica tiene tres etapas: i) separación por tamaño generalmente en un gel de poliacrilamida; ii) transferencia por difusión simple, por vacío o electroforesis a un soporte sólido (membrana de nitrocelulosa, éster de celulosa, o generalmente fluoruro de polivinilideno o PVDF) y, finalmente; iii) visualización colorimétrica mediante ELISA directo o indirecto, con el uso de anticuerpos específicos marcados usualmente con fosfatasa alcalina, o anticuerpos específicos y antiespecie conjugados y un sustrato apropiado. También se puede realizar el revelado mediante quimioluminiscencia, fluorescencia, o radiactividad. Se han diseñado aparatos que permiten la electrotransferencia simultánea a varias membranas, con objeto de revelar las distintas copias con diferentes anticuerpos específicos. Están disponibles comercialmente membranas de nitrocelulosa o fluoruro de polivinilideno, polifluoruro de vinilideno o polivinilideno fluoruro (PVDF) precortadas, compatibles con la mayoría de aparatos de electrotransferencia.
Mostrando 4 resultados para "transferencia Western"
nitrocelulosa
Derivado de nitrato de la celulosa utilizado como polvo o convertido en filtros de membrana de porosidad definida. Se utiliza para fijar ácidos nucleicos en procedimientos de transferencia Northern y Southern y de proteínas en transferencia Western e inmunoimpresión. Actualmente es reemplazada por membranas de ésteres mezclados de nitrocelulosa, ya que la nitrocelulosa pura seca es explosiva y puede encenderse o explotar por calor, chispas o fricción.
análisis Western
wéstern
Vocablo inglés, frecuentemente utilizado en español para referirse a inmunoelectrotransferencia de proteínas separadas en un gel e inmovilizadas en una membrana.