Diccionario

Método para estimar la concentración de fragmentos de ADN o de moléculas de ARN o de proteína presentes en una muestra. Consiste en transferir directamente una alícuota de la muestra sobre una membrana de filtro de nitrocelulosa, éster de celulosa o nailon y en hibridar el ácido nucleico fijado a la membrana con una sonda. Si se trata de proteínas, consiste en hacer reaccionar la proteína de interés fijada a la membrana con un anticuerpo específico, previo marcado o conjugación de la sonda o del anticuerpo con isótopos radioactivos o fluorocromos. Tras lavados, la radiación ionizante o la fluorescencia emitida por la sonda o el anticuerpo se detectan por autorradiografía, fluorografía o imagen digital. Si en la membrana se ha incluido como referencia una serie de diluciones del mismo polinucleótido purificado o de la misma proteína purificada de concentración conocida, es posible cuantificar la cantidad de ácido nucleico o de proteína presente en la muestra analizada, por comparación de la intensidad de la mancha con la de la muestra de referencia. El método permite detectar hasta un picogramo (1 pg) de ácido nucleico; según definición del Vocabulario inglés-español de bioquímica y biología molecular de María V. Saladrigas (www.medtrad.org/panacea.html). Se denomina transferencia puntual cuando se efectúa de forma puntual o por hoyos.