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ultracentrífuga

Centrífuga capaz de alcanzar altas velocidades, con una fuerza centrífuga relativa incluso superior a 1.000.000 x g, y que se utiliza para la preparación o análisis de células, membranas, partículas subcelulares, proteínas, viriones, ácidos nucleicos y otras macromoléculas. Las elevadas fuerzas que se crean en una ultracentrífuga provocan la sedimentación de las partículas a una velocidad que depende de la viscosidad y del medio a través del cual se desplazan o mueven, así como de la forma, densidad y peso molecular de las partículas. A partir de las velocidades de sedimentación de proteínas y ácidos nucleicos es posible calcular con precisión su peso molecular. Las partículas también suelen centrifugarse a través de un gradiente de densidad (continuo o discontinuo) en el cual alcanzan la posición de equilibrio en un punto equivalente a su densidad. La separación de una mezcla de partículas es superior si se utiliza un gradiente de densidad discontinuo.

ultracentrífuga analítica

Aquella provista de un sistema óptico que visualiza la sedimentación de la muestra en tiempo real, lo que a su vez permite la obtención de datos precisos de sus propiedades de sedimentación (coeficientes de sedimentación y pesos moleculares).

ultracentrífuga preparativa

Aquella cuyo objetivo es meramente la purificación de las muestras para su uso posterior, al aislar las partículas con bajo coeficiente de sedimentación, como virus y macromoléculas.

ultracentrifugación

Técnica de centrifugación a alta velocidad que permite estudiar las características de sedimentación de partículas virales o de estructuras subcelulares o biomoléculas y separarlas. Utiliza rotores de ángulo fijo o basculantes o de columpio y normalmente se realiza en un gradiente de densidad. La identificación de la banda correspondiente a las partículas virales que han migrado a través del gradiente se realiza por luz ultravioleta o interferómetros. También se utiliza para concentrar partículas virales en el fondo del tubo de centrífuga donde forman un precipitado hialino o traslúcido. La ultracentrifugación se realiza con altas fuerzas centrífugas desde 15.000 x g hasta 600.000 x g o más.

centrífuga

Aparato que utiliza la fuerza centrífuga para separar sustancias, células o partículas de densidad y forma diferente, y eliminar agua. Pueden ser de mesa (de pocas g hasta aproximadamente 3.000 g y aptas para viales o microtubos), centrífugas preparativas o supercentrífugas (de 2.000 a 20.000 g aptas para tubos de volumen variable de 10 a 50 mL) y ultracentrífugas (de 15.000 a 600.000 g aptas para tubos de 10 a 50 mL).

coeficiente de sedimentación

Aquel que se calcula en ultracentrífugas para una partícula o macromolécula, dividiendo su velocidad constante de sedimentación (en m/s) por la aceleración aplicada (en m/s2). Los valores del coeficiente de sedimentación se expresan en svedbergs (S) y no son aditivos, pues dependen tanto de la masa como de la forma de la macromolécula o partícula. Es una medida utilizada para la caracterización de los viriones y de sus ácidos nucleicos.

rotor

1. Parte giratoria de una máquina electromagnética o de una turbina de aparatos de laboratorio. 2. Disco de plástico o metal en el que se insertan tubos de ensayo, viales o tubos de centrífuga, o bien bloque metálico, normalmente de aleación de aluminio o titanio, que dispone de huecos inclinados para albergar tubos de centrífuga. El rotor puede girar a bajas revoluciones por minuto (rpm) en centrífugas de mesa (desde 1 hasta 1.000 rpm) hasta altas revoluciones (hasta 150.000 rpm) en ultracentrífugas. En función del radio del rotor y la velocidad angular, se aplicará tanta fuerza centrífuga como recomiende el protocolo empleado.

Svedberg

Unidad de medida de la velocidad de sedimentación, que no pertenece al Sistema Internacional. Se emplea en ultracentrifugación para medir el coeficiente de sedimentación de partículas o macromoléculas cuando se centrifugan. Habitualmente se utiliza en biología para dar idea del tamaño y forma, así los ribosomas presentes en el citoplasma de procariotas (70s) son menores que los presentes en eucariotas (80s). Sus símbolos son S y Sv.

valor S

Medida estimada del tamaño de las macromoléculas, virus, viroides y partículas subcelulares según sea su velocidad de sedimentación mediante ultracentrifugación analítica. Depende del peso y forma de la molécula o partícula y su valor se expresa en unidades svedberg.

Sociedad Española de Fitopatología
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