Diccionario

Estado reversible en el que diversas especies de microorganismos permanecen viables y mantienen su poder patógeno, pero no crecen in vitro en medios de cultivo convencionales.

Destrucción de microorganismos y desnaturalización de ácidos nucleicos cercanos a una fuente de luz ultravioleta de 253 nm. El método se utiliza en espacios cerrados, cámaras de flujo laminar y recintos estériles. Su efecto desinfectante para bacterias fitopatógenas presentes en agua no suele ser total y puede inducir, en el caso de algunas especies como la bacteria Ralstonia solanacearum, el estado viable no cultivable (VNC).

Estado en el que diversas especies de bacterias fitopatógenas y otras permanecen viables y mantienen su poder patógeno, pero no crecen en medios de cultivo convencionales. Es un estado reversible de supervivencia en condiciones de estrés o en condiciones ambientales adversas. Se manifiesta por la falta de crecimiento in vitro en forma de colonias en medios no selectivos. Dicho estado se puede inducir experimentalmente por tratamiento con cobre u otros productos químicos, medios pobres en nutrientes, por temperaturas altas o bajas u otros tipos de estreses. En este estado, se reduce la actividad metabólica de las bacterias, lo que las hace menos sensibles a los estreses. Para diferenciar el estado viable no cultivable de un simple estado previo a la muerte celular, se deben cumplir dos requisitos: debe mantenerse mientras persistan las condiciones ambientales desfavorables, y debe ser reversible (capacidad de resucitación) cuando estas desaparezcan.

Determinación del número de células en una población capaz de crecer y reproducirse (multiplicarse). En cultivos bacterianos un método sensible es el conteo de colonias visibles crecidas sobre un medio de cultivo sólido, a partir de la siembra de una dilución de una suspensión de baja concentración bacteriana, con el fin de lograr que cada célula se encuentre aislada y sea sencillo contar las colonias aparecidas en el medio utilizado. Cuando la concentración inicial es baja se suele proceder a filtrar la muestra a través de una membrana, para aumentar su concentración, que posteriormente se siembra en una placa de Petri. Se suele confundir viabilidad y cultivabilidad. El método descrito lo que calcula es el número de células cultivables en un medio determinado, pero no todas las células viables son cultivables. En otras ocasiones, puede valorarse la viabilidad celular, mediante: i) evaluación de la integridad de la membrana celular, mediante sustancias colorantes o fluorescentes, tinciones catiónicas o métodos basados en la liberación de sustancias al medio extracelular; ii) ensayos funcionales, como la cuantificación de los niveles de adenosín trifosfato (ATP), síntesis del nuevo ADN, o por detección de proteínas relacionadas con la proliferación celular; iii) métodos basados en biosensores de fluorescencia (marcadores de proteínas); iv) métodos según morfología celular; v) métodos de microanálisis por energía dispersiva de rayos X; vi) métodos de determinación de la expresión génica (microchips), o vii) mediante el uso de PCR cuantitativa con agentes intercalantes que únicamente permiten la detección de células viables, ya que solo pueden atravesar membranas celulares comprometidas y bloquear la amplificación.