1. Estimación del número de unidades formadoras de colonias en una población de microorganismos. 2. Aquel referido a colonias de pulgones establecidas en una planta. Para ello se muestrea un número determinado de hojas por planta, procurando que estén repartidas homogéneamente en altura y con respecto a la orientación, en varios árboles de la plantación o en varias plantas herbáceas del cultivo. Constituye un sistema utilizado para obtener información de la composición de la fauna de pulgones (afídica) que vive y se reproduce en las hojas.
crecimiento exponencial
Aumento de la población en el que la tasa de crecimiento por individuo es la misma, sin importar el tamaño de la población, lo que hace que aumente cada vez más rápido conforme la población se vaya haciendo más grande, aunque finalmente se ve limitado por la escasez de recursos o la acumulación de sustancias tóxicas. En una representación gráfica lineal, suele producir una curva en forma de J. La medición de la curva de crecimiento exponencial de las bacterias en un cultivo en laboratorio se realiza por conteo, por métodos directos individuales (microscopía óptica, citometría de flujo), por métodos directos y masivos (biomasa), por métodos indirectos e individuales (conteo de colonias), o por métodos indirectos y en bloque (número más probable, turbidez, absorción de nutrientes). El crecimiento se muestra como el logaritmo del número de colonias con actividad reproductora positiva por mL, en función del tiempo de incubación.
recuento celular
Método para estimar el número de células en una muestra de un cultivo. Puede efectuarse manualmente o mediante un contador automático de células. El conteo manual directo se efectúa contando las células en una dilución mediante una cámara de Neubauer para obtener un resultado estimado. Los conteos manuales indirectos suponen la dilución de las células y su siembra en placas de Petri, para el posterior conteo de colonias crecidas, que puede efectuarse, a su vez, con un contador de colonias manual o automático, asumiendo que de cada célula viable se genera una única colonia.
recuento de viables
Determinación del número de células en una población capaz de crecer y reproducirse (multiplicarse). En cultivos bacterianos un método sensible es el conteo de colonias visibles crecidas sobre un medio de cultivo sólido, a partir de la siembra de una dilución de una suspensión de baja concentración bacteriana, con el fin de lograr que cada célula se encuentre aislada y sea sencillo contar las colonias aparecidas en el medio utilizado. Cuando la concentración inicial es baja se suele proceder a filtrar la muestra a través de una membrana, para aumentar su concentración, que posteriormente se siembra en una placa de Petri. Se suele confundir viabilidad y cultivabilidad. El método descrito lo que calcula es el número de células cultivables en un medio determinado, pero no todas las células viables son cultivables. En otras ocasiones, puede valorarse la viabilidad celular, mediante: i) evaluación de la integridad de la membrana celular, mediante sustancias colorantes o fluorescentes, tinciones catiónicas o métodos basados en la liberación de sustancias al medio extracelular; ii) ensayos funcionales, como la cuantificación de los niveles de adenosín trifosfato (ATP), síntesis del nuevo ADN, o por detección de proteínas relacionadas con la proliferación celular; iii) métodos basados en biosensores de fluorescencia (marcadores de proteínas); iv) métodos según morfología celular; v) métodos de microanálisis por energía dispersiva de rayos X; vi) métodos de determinación de la expresión génica (microchips), o vii) mediante el uso de PCR cuantitativa con agentes intercalantes que únicamente permiten la detección de células viables, ya que solo pueden atravesar membranas celulares comprometidas y bloquear la amplificación.
suspensión microbiológica
Conjunto de células bacterianas procedentes de colonias, esporas de hongos, etc. que se distribuyen en un líquido (agua o tampón) o se obtienen directamente de un fermentador. Permiten una estimación rápida del crecimiento bacteriano, para lo cual se han desarrollado métodos turbidimétricos que miden la absorbancia de las bacterias en el cultivo y puede ser comparada con un patrón realizado con diluciones seriadas de una suspensión estándar de cloruro de bario. Para determinar con precisión el crecimiento microbiano, se toma una muestra del caldo de fermentación o y se siembran alícuotas en medios de conteo de colonias o se mide la absorbancia de la muestra con un espectrofotómetro o un colorímetro, a una longitud de onda constante. La medición de la densidad óptica con un espectrofotómetro es un método rápido y fácil para obtener la curva de crecimiento de un microorganismo. Las mediciones de la densidad óptica proporcionan información útil para el control del cultivo alimentado en un fermentador, por lo que resulta ideal realizar estas mediciones directamente en el proceso y así, obtener valores en tiempo real. Las suspensiones de propágulos de otros microorganismos suelen cuantificarse utilizando un hemocitómetro, o cámara de Neubauer. Las suspensiones valoradas se utilizan frecuentemente en inoculación de plantas.
conteo microbiológico
Indica la magnitud de la población total bacteriana o fúngica. Se puede determinar por diversas técnicas que se basan en conteos de colonias en caja o placa de Petri, filtración de un volumen conocido de las células o esporas retenidas en la superficie de un filtro de 0,45 μm, método del número más probable, determinación directa al microscopio, método de la turbidez en un espectrofotómetro (colorímetro), o determinación del peso seco en las células o masa celular, etc.