Diccionario

Determinante antigénico de estructura definida o un hapteno, que es capaz de inducir la síntesis de anticuerpos en el animal inmunizado. Se combina o es reconocido por el paratopo del anticuerpo. La excepción son los epítopos lineales, que son determinados por la secuencia de aminoácidos (la estructura primaria) en vez de por la forma tridimensional (estructura terciaria) de una proteína, que constituye los epítopos conformacionales. Se pueden establecer mapas epitópicos de agentes patógenos completos si se dispone de anticuerpos monoclonales específicos pues cada uno de ellos reaccionará únicamente con un epítopo del antígeno (agente patógeno).

Aquel producido por la tecnología de hibridomas desarrollada por Georges Khöler y César Milstein (1975), mediante el cultivo de un solo tipo de células híbridas entre un linfocito B de un animal inmunizado y células de mieloma de crecimiento continuo in vitro. Por tanto, está constituido por una sola especie o isotipo de inmunoglobulina, que proviene de un único clon, es totalmente específico del epítopo que lo originó y homogéneo. Los hibridomas productores de anticuerpos pueden mantenerse indefinidamente congelados en nitrógeno líquido ya que los anticuerpos segregados en cultivo in vitro, mantienen sus características en el tiempo.

Cualquier molécula, expresada en un sistema heterólogo, que sea capaz de reconocer o unirse específicamente a epítopos en moléculas antigénicas, o no. Son sintéticos, producidos por técnicas de ingeniería genética y constituidos por fragmentos de anticuerpo producidos al expresar genes de anticuerpo en fagos, bacterias, levaduras, o plantas transgénicas. Su producción no precisa animales inmunizados, pues se basa en genotecas sintéticas, aunque pueden obtenerse de genotecas de linfocitos B de animales inmunizados o de hibridomas. Normalmente están formados por el fragmento variable (scFv, del inglés single chain variable fragment) de la cadena pesada y ligera de una inmunoglobulina (responsables del reconocimiento del antígeno) unidas por un péptido sintético que trata de reproducir su posición espacial apta para reconocer epítopos. Se suelen estabilizar con cremalleras de leucina y dominios y pueden constituir conjugados sintéticos al llevar enzimas como producto de fusión. Su expresión en plantas transgénicas puede inmunomodular la infección y conferir artificialmente resistencia mediante los denominados fitoanticuerpos.

1. Cualquier sustancia que, al ingresar en un organismo inmunocompetente, estimula la producción de una o varias series de anticuerpos específicos que se unen a ella a través de unos sitios denominados epítopos o determinantes antigénicos. Un mismo antígeno puede contener múltiples epítopos, algunos de los cuales pueden estar repetidos, y cada epítopo es específico de un anticuerpo. Todos los inmunógenos son antigénicos, pero no todos los inmunógenos son immunogénicos La capacidad de un antígeno para reaccionar específicamente con un anticuerpo se denomina reactividad antigénica. 2. Cualquier sustancia que es capaz de unirse de forma específica a un anticuerpo o a un receptor localizado en la superficie de los linfocitos T. Los antígenos que se unen a anticuerpos son de naturaleza extremadamente diversa (pueden ser desde sustancias relativamente sencillas, como los lípidos y las hormonas, hasta macromoléculas más complejas, como los ácidos nucleicos y las proteínas, e incluso virus o un fragmento de célula, por citar unos ejemplos); en cambio, los que se unen con el receptor de superficie de los linfocitos T son únicamente de naturaleza proteínica.

Aquel obtenido mediante técnicas de ingeniería genética y que es capaz de inducir la síntesis de anticuerpos en un animal inmunizado, o de ser efectivo en seleccionar anticuerpos recombinantes. Además, debe de ser reconocido mediante la reacción antígeno-anticuerpo in vitro. Poseen interés si son muy similares a los antígenos nativos, aunque frecuentemente sufren cambios en sus epítopos que no les permite ser reconocidos por anticuerpos generados con antígenos nativos o no desnaturalizados.

Técnica serológica de microscopía electrónica en la que la muestra es incubada primero con anticuerpos específicos del agente patógeno (muestra) marcados con una sustancia densa a los electrones (como oro coloidal o hierro), o con anticuerpos específicos (producidos en una especie animal determinada) y posteriormente con inmunoglobulinas anti o contra la especie primera, conjugadas con oro coloidal, antes de su observación. La imagen del objeto en estudio aparecerá recubierta (decorada) con los anticuerpos que hayan reconocido específicamente a los epítopos contenidos en la muestra estudiada, facilitando su localización en los tejidos vegetales o del vector, y su detección e identificación específica.

Técnica serológica que combina un sistema integral de análisis o dispositivo, basado en anticuerpos inmovilizados en una única tira de membrana que posee dos zonas (de conjugado y de captura) y permite la determinación rápida (5-15 minutos) de la presencia o ausencia de un patógeno o sus metabolitos o incluso de diversos analitos, como de dos aislados del mismo virus o de diferentes. Los dispositivos más utilizados en Fitopatología están compuestos por tiras reactivas inmunocromatográficas de nitrocelulosa o éster de celulosa. Para realizar el análisis, se añade una gota de extracto de la muestra o de una suspensión de células del microorganismo por un orificio redondo en la denominada zona de conjugado, mezclada con anticuerpos específicos del patógeno a detectar pero conjugados usualmente con nanopartículas de carbón coloreadas. Si la muestra contiene el antígeno problema, este se unirá a los anticuerpos conjugados formando un complejo que migrará a través de la membrana. Si no, migrarán separados el anticuerpo conjugado y la muestra sin antígeno, sin unirse. En la zona de captura del dispositivo (dos líneas separadas de anticuerpos) se encuentran fijados en una primera línea anticuerpos específicos frente a otro epítopo del antígeno problema. Al llegar la muestra a esta primera línea, los complejos formados por la unión del antígeno (muestra) con el conjugado quedarán retenidos y la línea se coloreará en este caso en rosa, negro o azul, según el color del delator (muestra positiva). En el caso contrario, si las muestras son negativas, aparecerá una segunda línea donde los conjugados sin fijarse al antígeno inexistente, quedarán retenidos por anticuerpos anti la especie animal utilizada en la prueba. Así pues, la aparición de dos líneas (positivo y control) indicarán la presencia del patógeno analizado y la aparición de una única línea de control indicará la ausencia del patógeno o su presencia en concentración inferior al límite de detección de la técnica y sus reactivos. Esta evaluación visual permite el análisis cualitativo y semicuantitativo. Mediante un lector especial, se pueden analizar de forma cuantitativa las tiras reactivas. Además de la rapidez de los resultados y la sencilla manipulación, los ensayos de flujo lateral tienen la ventaja de poder ser utilizadas en condiciones de campo por personal no especializado a un coste económico relativamente bajo.

Modalidad de inmunodifusión en la que una serie de pocillos excavados en un medio gelosado (0,5 a 1,2 % de agar con azida sódica como preservativo) y que contienen distintas muestras o suspensiones de agentes patógenos cuyos antígenos solubles se desean comparar, rodean regularmente a un pocillo central desde el que se dispensan los anticuerpos (antisuero o anticuerpos monoclonales). Los contenidos de los pocillos migran unos hacia otros. Se efectúa en láminas portaobjetos de manera estándar o en placas de Petri cuyo gel se troquela con sacabocados o matrices de tubitos o cuchillas circulares con una configuración geométrica. El agar es extraído por succión al vacío y se dispensan las muestras de antígenos y en el pocillo central los anticuerpos. Se incuba en ambiente húmedo en recipientes o tanques de inmunodifusión apropiados y los anticuerpos difunden hacia los antígenos y viceversa. Cuando se produce la equivalencia precipitan en líneas de precipitado opaco, que una vez desecado el gel pueden teñirse para mejor observación. La unión de líneas de precipitado que se fusionan entre dos pocillos contiguos indica identidad o total homología antigénica entre el contenido de ambos pocillos que comparten los mismos epítopos. La aparición de líneas de precipitado que se cruzan indica no identidad entre el contenido de ambos pocillos ya que no comparten ningún epítopo. Si entre dos pocillos contiguos se produce una línea de precipitado común, pero se genera un espolón (cruce de una única línea), indica identidad parcial entre los epítopos de uno y otro pocillo, indicando que comparten epítopos pero no todos (identidad parcial). La no aparición de línea de precipitado en un pocillo y la aparición de línea de precipitado en el otro, indica ausencia total de identidad (antígenos heterólogos).

Complejo insoluble formado en equivalencia por anticuerpos y epítopos de antígenos solubles reconocidos por los anticuerpos. Constituye la base de las técnicas de inmunodifusión e inmunoprecipitación. El producto precipitado se puede recuperar por filtración o centrifugación para su análisis.

Conjunto de técnicas que permiten la identificación de los sitios de los antígenos (o antigénicos) en las células, micelio o partículas de patógenos, mediante el uso de anticuerpos conjugados con moléculas delatoras, como ferritina, oro coloidal, enzimas, tinte fluorescente, etc. Permiten establecer el grado de parentesco serológico entre cepas o aislados de un mismo patógeno o diferentes. Realizadas con anticuerpos monoclonales permiten efectuar mapas de epítopos.

Región del anticuerpo que reconoce y se une al antígeno. Es complementario del epítopo, para el que es específico.

Aquella que tiene lugar entre un reactivo (anticuerpo, sonda, cebador, sustrato, etc.) y una diana distinta de la pretendida, pero similar a la que sirvió para diseñar o producir el reactivo supuestamente específico. También se denomina reactividad cruzada. En la naturaleza todo es limitado, por lo tanto, pueden coincidir por simple casualidad, además de por parentesco, secuencias, proteínas, dianas, epítopos, etc. de un patógeno con las de otro o con las de su huésped o anfitrión, otras plantas, su vector u otros. Así, un antígeno de un agente patógeno puede ser reconocido por anticuerpos desarrollados contra otro patógeno, o coincidir en toda o una gran parte de la secuencia empleada para diseñar una sonda o un cebador, con la secuencia de otro agente patógeno o incluso del huésped o de otro organismo. Las reacciones cruzadas son específicas, aunque generalmente indeseadas, salvo en casos en los que se desee establecer y valorar el parentesco inmunológico, bioquímico o de secuencias, entre distintas dianas.

Grupo de serotipos que poseen uno o más antígenos en común. Conjunto de microorganismos artificialmente agrupados por su reacción frente a técnicas serológicas, que indican poseer las mismas características serológicas o muy similares (antígenos comunes). Ello se debe a poseer un estrecho parentesco serológico natural debido a su similar composición antigénica (epitópica). Un serogrupo es claramente diferenciable de otro distinto. Los serogrupos pueden establecerse mediante antisueros (implican a numerosos motivos antigénicos comunes) o con anticuerpos monoclonales específicos (implican únicamente a un motivo, determinante antigénico o epítopo común). Son muy útiles para establecer tasa o porcentaje de parentesco serológico entre especies de microorganismos. Se usan en diagnóstico, si además llevan asociada una característica distintiva de tipo biológico, patogénico, de transmisión, o ligada al huésped o anfitrión.

Conjunto de técnicas que se basan en la especificidad de la reacción antígeno-anticuerpo para la detección e identificación de sustancias antigénicas (proteínas o polisacáridos de alto peso molecular) y los organismos que las portan. Comprende el estudio, detección e identificación de antígenos y sus epítopos, anticuerpos o fragmentos de ellos capaces de reconocer antígenos y su obtención, y sus reacciones específicas in vitro o in vivo (in planta). Tiene por objeto el estudio de anticuerpos y de la reacción antígeno-anticuerpo para la caracterización, diagnóstico, detección o comparación de agentes patógenos tanto de humanos, como de animales o de plantas y de sus metabolitos y de sus huéspedes o anfitriones, de forma cualitativa o cuantitativa.

1. Secuencia de pares de bases reconocida por una endonucleasa de restricción. 2. Secuencia de pares de bases, epítopo o determinante antigénico, reconocido por un anticuerpo.

1. Región o zona de un patógeno o sus metabolitos, elegida para producir o diseñar herramientas o reactivos apropiados para su diagnóstico universal (sitios conservados) o específico o para su inactivación efectiva por medio de pesticidas o agentes de biocontrol. 2. Región de la secuencia que se utiliza en el diseño de sondas o cebadores, ya sea por su especificidad o por representar una secuencia conservada y, por tanto, apta para un diagnóstico universal. 3. Epítopo o determinante antigénico elegido para diagnóstico selectivo o universal, por medio de anticuerpos, generalmente monoclonales o recombinantes producidos frente al mismo, ya sea natural (purificado) o sintético (generalmente péptidos).

1. Número o valor que expresa la capacidad de un átomo o radical para formar compuestos químicos con otros, por ejemplo, la valencia del hidrógeno es uno, la del oxígeno dos, la del carbono cuatro. 2. Número de epítopos con los que puede reaccionar un anticuerpo. Para la mayoría de los anticuerpos generados tras inmunización experimental es dos (IgG), pero las IgM pueden tener una valencia hasta de 10 y las IgA poseen distintas valencias dependiendo de su grado de polimerización. La valencia define la capacidad de un determinado anticuerpo para reaccionar con epítopos de un antígeno.

Porción de la estructura del antígeno a la que se une el anticuerpo específico.