Resultado del efecto de disgregar, triturar o hacer homogéneas muestras biológicas en presencia de un tampón apropiado. La misión del tampón es evitar oxidaciones y mantener las dianas de interés de la muestra en condiciones que eviten su desnaturalización o degradación. Puede ser preparativo para realizar posteriores purificaciones o concentraciones del extracto, o definitivo si se utiliza directamente para detección o diagnóstico como un extracto bruto.
homogeneizador
Aparato muy común para la preparación de extractos de muestras biológicas de suelo o de tejidos vegetales, de extractos previa a análisis serológicos, moleculares o de amplificación molecular, estudio de proteínas, ácidos nucleicos o de agentes patógenos, células, metabolismo celular, etc. Estos aparatos tratan de disgregar los tejidos y romper las células, dañando lo menos posible la membrana plasmática. La preparación de la muestra puede generarse en el homogeneizador mediante fuerzas de cizalladura producidas por líquidos (homogeneizadores de vástago), mediante fuerzas de cizalladura producidas por sólidos (mortero y mazo, bolsas de malla fina con homogeneizadores de rodamientos manuales o incluso semiautomáticos como el extractor Tecan, o con bolsas de malla gruesa con martillo, prensa de rodillos lisos o acanalados, extractor de Gugerli, molinos de bolas, molinillos de aspas, batidoras-trituradoras), mediante cavitación gaseosa (bomba de nitrógeno, generadores de ultrasonidos) o mediante medios químicos o bioquímicos (medio hipotónico, rotura celular con lisozima). Es preciso utilizar sistemas que minimicen la contaminación cruzada, la generación de aerosoles y que reduzcan el ruido, como la preparación de homogeneizados en bolsas de plástico, que pueden ser estériles y provistas de malla fina filtrante o gruesa que ayude en la trituración de material leñoso. Los más utilizados para análisis serológicos y de hibridación molecular son los homogeneizadores de vástago, extractor de Gugerli (para patata o papa) y los de rodamientos en bolsas. Para análisis por amplificación molecular los más usuales son los homogeneizadores Homex 6 y el homogeneizador manual de rodamientos, ambos en bolsas. Los robots capaces de homogeneizar gran número de muestras de tejidos vegetales, manteniendo los extractos a baja temperatura y extrayendo el ADN, previo a la amplificación por PCR en tiempo real, son cada vez más usados por ser muy útiles para el análisis de gran número de muestras de prospecciones masivas.
homogeneizador de palas
Instrumento para realizar mezclas u homogeneizaciones en laboratorio. Funcionan por la acción de palas gemelas oscilantes que alternativamente actúan sobre la muestra contenida en el interior de una bolsa de plástico estéril. La velocidad y tiempo de acción de las palas es regulable. No generan contaminación cruzada entre muestras ni sobrecalientan las mismas. Son útiles para mezcla y disolución de productos en líquidos, lavado y preparación de muestras de suelo, lavados superficiales, enjuagues, preparación de muestras para inmunofluorescencia o PCR en tiempo real para hongos y bacterias. No desgarran ni trituran el material vegetal, especialmente si es leñoso, por lo que no generan homogenizados o extractos brutos recomendables para detección de virus o patógenos vasculares. El más conocido es el modelo Stomacher de la marca Seward, nombre por el que a menudo se conocen este tipo de homogeneizadores.
homogeneizador de vástago
Instrumento que consta de un vástago metálico sobre el que gira, uno concéntrico provisto de dientes de acero o cuchillas a altas revoluciones (regulable hasta 5.000 rpm). Tienen la misión de homogeneizar y dispersar. Los trozos sólidos de material vegetal, previamente seccionado por fuerzas de cizalladura en el seno de un líquido (tampón apropiado de extracción), van disminuyendo de tamaño conforme gira el vástago durante unos segundos, hasta constituir un extracto. Existen disponibles vástagos de diferente diámetro aptos para ser introducidos en tubos de ensayo, vasos de precipitado o matraces. Son muy utilizados para preparar extractos utilizables en técnicas de detección ELISA. La contaminación cruzada que pueden generar entre muestras, se reduce lavando el vástago entre ellas con agua y durante unos segundos a altas revoluciones en agua o tampón de extracción con hielo picado seguido de un somero secado del vástago con papel absorbente. Son muy populares los modelos de homogeneizadores dispersadores de Polytron (Kinematika), Ultra Turrax o Wiggenhauser.
homogeneizador Homex 6
Marca comercial de instrumento de laboratorio que permite la realización casi automática de homogeneizados de material vegetal suculento (hojas, flores, peladuras de frutos, raicillas, o brotes herbáceos) en bolsas de plástico de preparación de extractos. Permite el tratamiento consecutivo de varias bolsas con muestra (hasta ocho) pudiendo regular el tiempo de funcionamiento en cada muestra y la velocidad de giro de los rodillos de rodamientos. Un operador puede procesar unas 250 muestras por hora, utilizables para técnicas ELISA, de hibridación molecular o de amplificación molecular por PCR. El sistema evita la contaminación cruzada entre muestras.
homogeneizador manual de rodamientos
Aparato sencillo que posee un cojinete de rodamiento de bolas de acero en la base y un soporte que permite hacerlo girar presionando manualmente sobre una bolsa de plástico de preparación de extractos. Se han impuesto por ser muy económicos y evitar la contaminación cruzada entre muestras, aunque solo se pueden emplear para material vegetal suculento.
homogeneizador ultrasónico
Aparato generador de ultrasonidos durante un período e intensidad controlados. Se utiliza para la molienda de tejido, disrupción celular, lisis y homogeneización de muestras biológicas en el seno de un líquido, comúnmente antes de la extracción de la materia intracelular en el rango molecular. Debido a la sonicación controlada de las muestras, ajustando el tiempo de tratamiento y la intensidad de sonicación (mediante cambios de la amplitud del 20 % al 100 %), se pueden efectuar todos los pasos (de la lisis a la extracción y la homogeneización) con el mismo aparato o disruptor ultrasónico de células.
bolsa de preparación de extractos
Bolsa de plástico de diferentes tamaños para preparar extractos del material vegetal allí introducido tras añadir un tampón de extracción conveniente. El sistema evita contaminación cruzada entre muestras que pueden ser recolectadas en campo en la misma bolsa, optimiza la extracción para el posterior análisis y permite el filtrado grosero gracias a estar provistas de una malla fina. Pueden ser utilizadas en homogeneizadores de rodillos semiautomáticos. Las hay con malla gruesa para facilitar el extracto de material leñoso al ser golpeado a través de la bolsa con un martillo de maza plástica o elemento duro. El dilacerado o extracto ligero también puede realizarse mediante suave presión sobre la bolsa introducida en aparatos específicos que admiten varias bolsas simultáneamente.
ombligo
1. Zona del tubérculo de la patata o papa opuesta a la corona en la que se presenta una pequeña cicatriz de unión del mismo al estolón de la planta. Posee cierta importancia su localización pues en dicha zona alcanzan mayor concentración algunos patógenos. En ella se deben muestrear preferentemente los tubérculos para la detección más sensible de las bacterias Ralstonia solanacearum y Clavibacter sepedonicus (sin. C. michiganensis subsp. sepedonicus). Para ciertos virus, como el del enrollado de la patata o papa (Potato leafroll virus-PLRV), se obtienen extractos pinchando mediante el homogeneizador de Gugerli, aunque actualmente la detección se realiza en yemas brotadas del tubérculo tras tratamiento con ácido giberélico. 2. Pequeño fruto rudimentario incluido en el extremo estilar del fruto principal de algunas variedades de naranjo y de otros agrios y grupo de variedades de naranjo, en las que ese fruto secundario está presente. 3. Poro en el perisporo de una ascospora.
politrón
Denominación común de un aparato de una marca comercial registrada de homogeneizador de vástago, fabricado por la empresa suiza Kinematika. Es apropiado para muestras leñosas previamente troceadas a un tamaño que pueda ser aspirado entre las piezas rotativas de acero del vástago. Debe lavarse abundantemente entre muestra y muestra para descontaminar, especialmente si se realizan pruebas de detección de alta sensibilidad, con el fin de evitar contaminaciones cruzadas.
prensa de rodillos
Aparato diseñado para preparar y recoger extractos producidos al introducir material vegetal suculento entre dos rodillos (lisos o acanalados) que giran uno contra otro en sentido contrario accionados por un motor eléctrico controlado con un pedal. Entre muestras se realiza un lavado con agua para descontaminar por dilución. La prensa Pollähne es una de las más conocidas y este tipo ha sido utilizado para la preparación de extractos de las numerosas muestras necesarias en programas de certificación de clavel, crisantemo, patata, etc. y análisis mediante la técnica ELISA en diversos programas de certificación. Actualmente está en desuso ante la aparición de homogeneizadores de rodamientos en bolsas individuales que evitan la contaminación cruzada entre muestras.
productividad
1. Relación entre lo producido y los medios empleados, tales como mano de obra, materiales, equipo, energía, etc., por tanto, representa el valor de los bienes y servicios producidos en un período de tiempo, dividido por las horas de trabajo utilizadas para producirlos. 2. Capacidad de producción. Número de resultados obtenidos o de procesos realizados, por unidad de tiempo. Con la creciente automatización se ha incrementado notablemente en los laboratorios, con el uso de dispensadores automáticos o pipetas multicanal, o de extractores de Gugerli en patata o papa o preparación de homogeneizados en bolsa por el sistema Tecan, robots que preparan muestras o extraen su ADN o ARN, etc., también con nuevas tecnologías que evitan correr geles (PCR en tiempo real), o la secuenciación automática de ADN, entre otras. 3. Capacidad o grado de producción por unidad de trabajo, superficie de tierra cultivada, equipo industrial, cultivar utilizado, estado sanitario del material vegetal inicial, etc. que hacen que se incremente significativamente la misma. 4. Acicate económico que se refleja en la nómina como recompensa laboral que premia la eficiencia de producción por factor utilizado, que es por unidad de trabajo o capital utilizado.
rodillo de rodamientos
Instrumento manual o automatizado que permite realizar homogeneizados de hojas, flores, peladuras de corteza o frutos u otro material suculento a través de una bolsa de plástico provista con malla. El sistema evita contaminaciones cruzadas. El homogeneizado o extracto se realiza al efectuar presión sobre la bolsa que contiene la muestra y el tampón, con un rodillo provisto de un cojinete antifricción formado por dos cilindros concéntricos entre los que se ha intercalado una corona de bolas o rodillos que puede girar libremente. Puede accionarse manualmente o de forma automática.
disruptor ultrasónico
Aparato generador de ondas ultrasónicas de alta densidad, más allá del rango audible, capaces de destruir células bacterianas y otros microorganismos. Se utiliza para limpieza, incluso esterilización de instrumentos y para lisar y disgregar bacterias y hongos y utilizarlos como antígeno en inmunizaciones. Su uso puede incrementar la sensibilidad de algunas técnicas serológicas al aumentar el número de dianas disponibles de una sola célula bacteriana.
extracto
jugo
Líquido o zumo de sustancias vegetales o animales extraído por presión, cocción o destilación. Generalmente en Fitopatología se obtiene por presión u homogeneización de muestras de material vegetal o vectores y constituye una de las bases de la detección o diagnóstico de patógenos o sus metabolitos tras clarificar su extracto, purificarlo o emplearlo bruto. En ocasiones se utiliza directamente como muestra, por ejemplo, el lloro de la vid, el zumo de fruta, o el líquido obtenido por ligera presión de tejidos u órganos suculentos de plantas o bien el fluido de xilema obtenido por presión positiva o el de floema que exuda libremente tras provocar una lesión o corte o cuando se inserta el estilete de un pulgón u otro vector. El jugo queda inmovilizado en los poros de la membrana, cuando se opta por la impresión de tejidos o por el escachado.