Diccionario

Pieza a modo de rejilla metálica, componente de la pistola de genes, utilizada en transformación de plantas y que detiene la membrana portadora de las micropartículas disparadas al tejido diana, dejando únicamente el paso de las mismas hacia el tejido.

Aquellas utilizadas para depositar la muestra antes de su observación en el microscopio electrónico. Son metálicas de aluminio, cobre, níquel, oro o titanio, circulares de 3 mm de diámetro y contienen numerosos orificios (250 mesh). Se suele reforzar depositando sobre ella una fina capa de carbono evaporada al vacío, sobre la cual se coloca la muestra.

Aquel de 50 – 100 nm de espesor para ser examinado en microscopía electrónica con el fin de detectar virus dentro de tejidos y células, donde además de la forma, tamaño y estructura, se pueden observar desviaciones citológicas o inclusiones. Para efectuarlos se utilizan cuchillas de vidrio o diamante, las cuales poseen detrás del filo un reservorio de agua, de manera tal que a medida que se efectúan los cortes, estos flotan en el agua y son recolectados directamente sobre rejillas o grillas con o sin película plástica; después se contrastan y quedan así listos para su observación al microscopio electrónico.

Instrumento analítico, que se compone de una fuente luminosa, una rejilla de difracción, un contenedor para muestras y un sistema de detección, que se utiliza para registrar espectros de absorción o medir variaciones de absorbancia a una longitud de onda fija. La fuente luminosa es una lámpara que genera radiación en la región de 200-360 nm (ultravioleta) o 360-760 nm (visible), que es difractada de forma que solo un estrecho haz de 1 o 2 mm de ancho, incida y pase a través de la muestra.

1. Uso de anticuerpos específicos para sensibilizar o tapizar tubos en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR o RT-PCR) con el fin de enriquecer en los patógenos de interés aquellos presentes en el extracto bruto de la muestra, en una fase previa a su detección. Requiere la obtención de extractos, pero evita la purificación de ácidos nucleicos de la muestra. Consiste en varias etapas: i) concentración de viriones o de células de cualquier otro patógeno presentes en el extracto vegetal por captura en las paredes de los tubos de PCR tapizados con anticuerpos específicos; ii) eliminación por sucesivos lavados de los restos del extracto vegetal e inhibidores no inmunocapturados; iii) realización de la reacción de amplificación en el mismo tubo. Los ácidos nucleicos del patógeno a detectar son liberados por el calor de la reacción. El método mejora la sensibilidad de la PCR o RT-PCR simple convencional, además de reducir inhibidores de los extractos vegetales y constituye un método sencillo y económico de preparación de muestras para amplificación, aunque su sensibilidad y sencillez ha sido muy superada por otras versiones de PCR. 2. (trapping). Tapizado o sensibilización con anticuerpos específicos de rejillas de microscopía electrónica con el fin de atrapar selectivamente partículas virales, células bacterianas o fúngicas presentes en la muestra depositada en la rejilla.

Conjunto de técnicas serológicas que combinan la especificidad de los anticuerpos con el alto poder de resolución de la microscopía electrónica. La reacción antígeno-anticuerpo puede ser visualizada y localizada a nivel celular o intercelular, utilizando anticuerpos marcados con oro coloidal u otro material denso a los electrones (decoración). También se utilizan para capturar antígenos específicos sobre rejillas de microscopía electrónica previamente sensibilizadas con anticuerpos, confiriendo gran sensibilidad y especificidad a las observaciones mediante microscopía electrónica (captura o inmunocaptura).

Tipo de microscopía en la que el haz de electrones atraviesa la muestra, que ha sido preparada en forma de secciones ultrafinas (en el caso de muestras de tamaño considerable). Las secciones efectuadas con un microtomo se fijan con glutaraldehído, se deshidratan y se tiñen con materiales opacos a los electrones, como acetato de uranilo, tetróxido de osmio, o citrato de plomo, entre otros. Las partículas pequeñas como virus, fragmentos de células, bacterias, esporas, ácidos nucleicos u otras, pueden montarse enteras sobre una rejilla y sombrearse directamente con metales, normalmente oro o platino, o teñirse negativamente con otro material denso a los electrones. Su límite de resolución es de aproximadamente 0,1 nm y pueden determinarse estructuras en dos dimensiones.

Sección de un material biológico obtenida con un ultramicrotomo para su observación, generalmente mediante microscopía electrónica. Se reconoce empíricamente por el color que produce el reflejo de la luz sobre su superficie. Este color, en función de su grosor, puede ser gris (menos de 60 nm), plata (60 a 90 nm), oro pálido (90 a 120 nm), oro intenso (120 a 150 nm), o púrpura (150 a 190 nm). Las secciones ultrafinas recién obtenidas quedan flotando sobre una balsa de agua que posee la propia cuchilla del ultramicrotomo y no se recogen sobre portaobjetos sino directamente sobre soportes de níquel o cobre denominados rejillas, para su tratamiento antes de la observación por microscopía electrónica de barrido.

Utensilio de hierro plastificado, plástico o acero inoxidable, que se utiliza en el laboratorio para mantener verticales y ordenados tubos de ensayo y viales.