PCR de ARN
Reacción de amplificación de ARN como en PCR convencional, que sigue los dos pasos siguientes: i) transcripción reversa o retrotranscripción del ARN para convertirlo en ADNc y ii) PCR convencional del ADNc con detección final de los amplicones.
RT-PCR
Reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa o reversa. Técnica de laboratorio comúnmente utilizada para generar copias de ADN partiendo de dianas de ARN. Se usa una enzima llamada retrotranscriptasa que convierte un segmento específico de ARN en un fragmento complementario de ADN. Luego, otra enzima llamada ADN polimerasa amplifica (produce en grandes cantidades) ese segmento de ADN. En el caso de que se utilice la técnica para evaluar actividad de transcripción, las copias de ADN amplificadas ayudan a identificar si hay un gen que produce la molécula específica de ARNm. Es posible usar la reacción en cadena de la polimerasa con retrotranscripción para detectar ciertos cambios en un gen o cromosoma, o para identificar la activación de ciertos genes, lo que ayuda a diagnosticar enfermedades, y para el estudio del ARN de ciertos virus (la gran mayoría de virus fitopatógenos poseen genoma de ARN). Posee las mismas variantes de reacción que la PCR.
transcriptasa reversa
Enzima del tipo ADN polimerasa, ya sea de origen celular o viral, que interviene en el proceso de replicación del ARN. Tiene como función sintetizar ADN de doble cadena utilizando como molde ARN monocatenario. Es decir, cataliza la retrotranscripción (transcripción reversa). Se encuentra presente en los retrovirus. Su nombre se debe a que el proceso normal de la transcripción (directa), codifica el ARN a partir de la secuencia inicial de ADN, y no al revés.
transcripción reversa
Proceso que implica la generación de una cadena de ácido desoxirribonucleico doble cadena complementario (ADNc) a partir de ácido ribonucleico (ARN) de cadena simple. La primera hebra de ADNc obtenida es la cadena complementaria de la cadena molde de ARN, y a partir de ella se sintetiza la segunda hebra de ADN para obtener una molécula bicatenaria. Como los viroides y la gran mayoría de los virus de plantas poseen genoma de ARN, la transcripción reversa se ha convertido en la técnica de referencia para la detección de ARN de patógenos mediante RT-PCR. El ARN es convertido o retrotranscrito a ADNc mediante el uso de cebadores de PCR y la acción de la enzima transcriptasa reversa.