Diccionario

Acción y efecto de validar o dar fuerza o firmeza a algo, hacerlo válido. En laboratorio es el proceso que determina la idoneidad de una prueba, que se ha desarrollado, optimizado y estandarizado adecuadamente para un fin concreto. Incluye estimaciones de las características del rendimiento analítico y de los parámetros de diagnóstico de la prueba e indica si las estimaciones del rendimiento de la prueba a validar están sesgadas respecto a los verdaderos valores del parámetro. Estos términos son aplicables con independencia de que la medición sea cuantitativa o cualitativa. La validación no implica necesariamente que el rendimiento de la prueba supere algún valor mínimo o que la prueba tenga un rendimiento comparable a cualquier otra prueba parecida o a una prueba de referencia o estándar de oro, a no ser que se haya tenido en cuenta específicamente en el diseño del estudio de evaluación de la misma. La validación es parte del control de calidad y esencial para la acreditación y proporciona información fundamental sobre el desempeño de las pruebas que se utilizan en el diagnóstico. Sin embargo, la mayoría de las pruebas de detección e identificación actualmente todavía solo se validan dentro de un laboratorio o mediante estudios de rendimiento de pruebas (TPS) limitados, y existe la necesidad de armonizarlas.

Para garantizar una evaluación apropiada durante la validación de autoclaves, se verifican los parámetros del proceso de esterilización, el sistema de envasado del producto, la carga biológica y la estabilidad e integridad del material utilizado. Asimismo, se debe validar que los valores de temperatura y presión del proceso sean los correctos durante los ciclos de esterilización, para garantizar el proceso de esterilización y la eficacia del equipo. Están disponibles comercialmente servicios de validación térmica de autoclaves, así como la calibración de los sensores tanto de temperatura como de presión. Son útiles los registradores de datos de temperatura y presión, construidos de acero inoxidable para su uso en ambientes hostiles, sumergibles, y capaces de soportar temperaturas de hasta 140 °C y con una precisión de ±0,1 °C. Estos registradores pueden almacenar miles de lecturas, y cuentan con una sonda externa rígida capaz de medir temperaturas de hasta 260 °C. El software hace que iniciar, detener y descargar el procesador de datos sea generalmente sencillo.

Rasgo característico, factor, medida o estándar decisivo en los que pueda basarse una opinión o decisión respecto al resultado de la prueba o test y su interpretación.

El rendimiento de las pruebas de detección o diagnóstico se ve afectado por diversos factores, que abarcan desde las primeras etapas del desarrollo hasta la etapa final de evaluación de los resultados cuando la prueba se aplica a poblaciones específicas de plantas o vectores. Una prueba, por lo tanto, no puede ser considerada válida a menos que se hayan comprobado y confirmado, o que haya cumplido un conjunto específico de criterios de validación esenciales, ya sea cuantitativa o cualitativamente. La falta de cumplimiento de cualquiera de estos criterios es probable que reduzca la confianza en que la prueba cumpla los objetivos deseados. Los primeros criterios por lo general se tratan durante la fase de desarrollo de la prueba: i) aptitud para el fin deseado; ii) optimización; iii) normalización; y iv) robustez. Los siete siguientes son evaluados durante las tres primeras etapas de la fase de validación de la prueba: v) repetibilidad; vi) sensibilidad analítica; vii) especificidad analítica; viii) umbrales (puntos de corte); ix) sensibilidad y especificidad diagnósticas; x) reproducibilidad; y xi) solidez.

Aquellas que se han de seguir para su validación, una vez se ha desarrollado el ensayo o test y se ha optimizado y establecido su robustez. Generalmente consta de cuatro etapas secuenciales: i) determinación inicial de sus características analíticas (especificidad analítica, sensibilidad analítica y estimación preliminar de su repetibilidad y reproducibilidad) comparada por el método de diagnóstico o detección estándar para ese patógeno; ii) estimación de sus características diagnósticas con cepas y muestras de referencia y cálculo de la especificidad diagnóstica, sensibilidad diagnóstica y determinación del umbral o punto de corte; iii) Estima de su reproducibilidad y solidez con un conjunto de muestras positivas y negativas (normalmente mitad de ellas positivas y otras tanto negativas) a evaluar entre distintos laboratorios colaboradores; y iv) Implementación, interpretación de la prueba en distintos laboratorios internacionales con muestras estándar de referencia y otras de campo. Tras esta validación la prueba suele publicarse en revistas científicas apropiadas para que pueda ser candidata a ser incluida en estándares internacionales tipo EPPO, IPPC-FAO o ISTA.

Sigla del inglés. En español, Colección Americana de Cultivos Tipo. Alberga una amplia colección de microorganismos de referencia disponibles bajo petición, suministro de permisos oficiales de importación y pago de tasas. Es muy útil para comparaciones, validaciones y controles con fines de detección, diagnóstico e identificación. Mantiene en cultivo hibridomas segregantes de anticuerpos monoclonales de interés fitopatológico, que cede para uso científico.

De forma genérica, se continúa aún empleando el término para referirse a todos los procariotas, si bien se distinguen dos Dominios claramente diferenciados: Bacteria, las bacterias propiamente dichas, y Archaea. Ambos Dominios, aunque comparten muchas características, se diferencian por una serie de características generales (entre otras, composición de la membrana citoplasmática, de la pared o de los ARNt). Entre los procariotas patógenos de plantas, que pertenecen todos al dominio Bacteria, se han considerado tradicionalmente dos grupos, los que poseen pared celular y los que carecen de la misma (Mollicutes). Las bacterias son organismos unicelulares, con diámetro medio de 1 µm y longitud generalmente de 0,1 a 10 µm. Carecen de membrana nuclear y se multiplican por bipartición o escisión. Se clasifican por su forma en cocos, bacilos, vibrios y espirilos, entre otras. Las bacterias fitopatógenas producen enfermedades en plantas, habitan los espacios intercelulares de los órganos vegetales (apoplasto), floema o xilema y pueden sobrevivir también, dependiendo de la especie, en suelo o sustrato y agua (algunas de ellas en forma viable no cultivable in vitro), en insectos vectores donde se pueden multiplicar en las glándulas salivales o en la hemolinfa y en muchos otros hábitats. Cuando se define una nueva familia, género, especie o subespecie procariótica, no es reconocida oficialmente hasta su publicación en las listas periódicas del International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology (IJSEM) tras su validación por el International Committee on Systematics of Prokaryotes (ICSP), mientras tanto aparece entre comillas, y su publicación en IJSM debe incluir una descripción detallada de las características y rangos diferenciales de la nueva especie, el nombre propuesto y el deposito en dos colecciones de cultivos microbianos. Si la nueva especie se publica en una revista distinta, la validación y aceptación formal debe solicitarse y aparecer como nombre aprobado en la lista que periódicamente se publica en el IJSEM, y que es elaborada por el ICSP, responsable de supervisar la taxonomía de bacterias y arqueas.

Órgano técnico-regulatorio de la Comisión Europea (CE) responsable de coordinar y apoyar a la Unión Europea (UE) en la toma de decisiones en Sanidad Vegetal (https://food.ec.europa.eu/horizontal-topics/committees/paff-committees/plant-health_en). Evalúa riesgos fitosanitarios, adopta medidas de gestión y control y establece criterios y estándares comunes que sirven de referencia para la aplicación de estrategias fitosanitarias por parte de los Estados miembros de la UE. Ejemplos de actuación del Comité Permanente de Sanidad Vegetal, son: i) la aprobación de medidas de emergencia frente a la introducción o detección de plagas cuarentenarias (como por ejemplo, Xylella fastidiosa, Anoplophora chinensis, etc.); ii) la definición de estrategias de gestión: erradicación, contención o supresión de organismos nocivos regulados; iii) el establecimiento de requisitos fitosanitarios para la importación y circulación de vegetales y productos vegetales dentro de la UE; iv) la actualización de listas de plagas reguladas y de organismos prioritarios; v) la coordinación de programas de vigilancia y prospección armonizados entre los Estados miembros; vi) la validación de protocolos oficiales de diagnóstico, muestreo y notificación de plagas; y vii) la asesoría técnica a la Comisión Europea para la elaboración o modificación de la normativa fitosanitaria.

Las pruebas que se utilizan para detectar o diagnosticar patógenos o sus metabolitos, se conocen comúnmente como pruebas in vitro (dentro del “vidrio”, pues estas pruebas generalmente se realizan en tubos de ensayo y equipos similares, o en un ambiente controlado fuera de un organismo vivo), a diferencia de las pruebas in vivo, que se realizan en el propio cuerpo, planta, sus tejidos o muestras de los mismos. No obstante, paradójicamente, los diagnósticos in vitro se refieren exclusivamente, según la normativa de la Unión Europea (UE), a análisis realizados en muestras de sangre o tejido humanos. Los diagnósticos no in vitro (non-IVD), son tests o pruebas que no entran normativamente en la categoría de diagnóstico in vitro, ya que no analizan muestras del cuerpo humano. Las clasificadas como pruebas no in vitro pueden incluir análisis en vivo, evaluaciones clínicas o métodos diagnósticos que no dependen de muestras biológicas procesadas externamente, o referirse a muestras de interés agrícola, forestal o ganadero. En la UE, los diagnósticos in vitro están regulados principalmente por el Reglamento (UE) 2017/746 del Parlamento Europeo y del Consejo sobre los diagnósticos in vitro (Reglamento IVD), que entró en vigor en 2022. Los dispositivos de diagnóstico in vitro comercializados en la UE, requieren un marcado CE para certificar que el dispositivo cumple con la Directiva Europea de Dispositivos de Diagnóstico in vitro (IVDD 98/79/EC). Los tests de detección y diagnóstico de plantas no son estrictamente considerados DIV, aunque pueden estar regulados bajo normativas de sanidad vegetal, biotecnología y estándares de calidad aplicables a laboratorios agrícolas, forestales y fitosanitarios, como el Reglamento UE 2016/2031 sobre medidas de protección contra plagas de los vegetales, la normativa sobre biotecnología y fitosanitarios en caso de implicar el test el uso de organismos modificados genéticamente o productos fitosanitarios, además de las normas ISO y las buenas prácticas de laboratorio (BPL). En la agricultura, silvicultura o selvicultura y sanidad vegetal y forestal, los métodos de diagnóstico serológico o de amplificación molecular, entre otros, son esenciales para detectar y diagnosticar patógenos en plantas o sus productos. Si estos métodos se desarrollan bajo normativas que suponen la regulación del diagnóstico in vitro (RDIV, IVDR), podrían estar sujetos a regulaciones similares, especialmente en términos de validación, trazabilidad y certificación de calidad.

1. Estudio detallado de algo. 2. En un sistema de gestión de calidad, determinación de acuerdo con los requisitos para un uso o aplicación previsto específico. Si el resultado de un ensayo muestra conformidad puede utilizarse con fines de validación.

Define aquella o aquellas pruebas de detección o diagnóstico que poseen la máxima fiabilidad o precisión dentro de una serie de condiciones específicas. Se suelen emplear para comparar con ella nuevas técnicas, realizar validaciones o efectuar análisis de referencia.

Acrónimo de Instituto Dominicano de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Institución estatal responsable de la ejecución de la política de investigación y validación agropecuaria y forestal de la República Dominicana. Fundado en 1985, posee tres Centros de investigación, los cuales se encuentran ubicados en diferentes zonas: La Vega (centro norte), San Juan de la Maguana (centro sur) y Pedro Brand (distrito nacional). Entre sus principales actividades se encuentra la protección vegetal.

Conjunto de productos y utensilios suficientes para conseguir un determinado fin o realizar un procedimiento concreto de análisis, diagnóstico, detección o identificación, que se comercializan como una unidad con fecha de preparación y de caducidad. Además de los mencionados, se comercializan muchos kits para procedimientos muy diversos, como para el aislamiento y purificación de ácidos nucleicos, plásmidos, o diversos tests fenotípicos, secuenciación, o identificación de células viables, que son especialmente importantes en Fitopatología. Existen kits completos que permiten realizar enteramente las operaciones de diagnóstico, detección o identificación, directa o indirecta de un patógeno. En ellos se proporcionan testigos, tampones y los diversos componentes en las proporciones adecuadas, envasados de manera que se obtenga el mejor rendimiento de los componentes costosos o difíciles de obtener. Algunos componentes pueden comercializarse incluso prepesados, parcialmente prefabricados o ligados a soportes sólidos, con el fin de evitar las etapas preparativas. Existen también kits parciales que contienen únicamente los reactivos clave (anticuerpos, conjugados, sondas, iniciadores, tampones, etc.) para el fin perseguido. De cara a ser aceptados e incluidos en estándares internacionales de diagnóstico, requieren su homologación y validación.

Indicador biológico autocontenido, utilizado para validación y control interno del proceso de esterilización a vapor. Después del proceso de esterilización a 121-137 °C, se extrae el vial del kit y se activa aplastando la ampolla de vidrio. El indicador químico colocado en la ampolla debe cambiar de azul a marrón (puede no ser un cambio inmediato y se recomienda esperar unas horas). Seguidamente se coloca la ampolla en una incubadora a 57 °C durante 48 horas, junto con otra prueba de una ampolla sin procesar, pero activada aplastando la ampolla de vidrio. Se comprueba cada 12 horas la presencia de crecimiento bacteriano, observando el color del líquido. Si el color del líquido no cambia (permanece morado), el proceso se ha superado con éxito. Si el líquido cambia de color (a verde-amarillento), indica un fallo en el proceso de esterilización.

Proceso de conversión de los valores brutos de una prueba para cada muestra problema en unidades de actividad respecto al estándar o estándares de trabajo. Los valores normalizados se pueden expresar de muchas maneras, como en porcentaje respecto al valor de un control positivo (como en una prueba ELISA), o como una concentración o título de un analito derivado de una curva estándar, o como un número de copias genómicas de la diana también derivadas de una curva estándar de valores Ct (umbral del ciclo) para PCR en tiempo real. Es una buena práctica incluir estándares de trabajo (o por lo menos una muestra razonablemente bien caracterizada) en todas las realizaciones durante el desarrollo y validación de la prueba, ya que esto permite una normalización de los datos, lo cual proporciona un medio válido para la comparación directa de los resultados entre las distintas ejecuciones de una prueba. Los sistemas automáticos de análisis permiten calcular y obtener estos datos mediante una curva estándar, o bien obtener el número del ciclo a partir del cual se está excediendo el umbral de ciclos, como en la PCR en tiempo real.

Plataforma que puede analizar hasta 100.000 muestras diarias, habitual en la industria farmacéutica o biotecnológica, y que ofrece posibilidades muy interesantes en Fitopatología y Sanidad Vegetal. Para aprovecharlas son necesarios diseños compatibles con las necesidades de análisis de decenas de miles de muestras o especímenes de insectos, o sustratos complejos con artrópodos fitófagos y agentes patógenos junto a organismos saprofitos o beneficiosos. Asimismo, son factores limitantes y críticos el manejo robotizado de muestras y el procesado de la información mediante bases de datos de elevada fiabilidad. Pero, además, la interpretación de los resultados requiere gran experiencia y pericia, tanto en el manejo de secuencias como en Fitopatología y en Taxonomía, así como en técnicas convencionales de identificación. Los requisitos para su validación serán muy complejos y se requerirán nuevas inversiones en infraestructuras y expertos bioinformáticos para el análisis y almacenamiento de datos. Todo ello requerirá colaboraciones internacionales y coordinación para establecer nuevos protocolos, controles, métodos de validación y bancos de datos comunes, para utilizar rutinariamente este tipo de plataformas.

Representa la proporción de resultados verdaderos (tanto positivos como negativos verdaderos) en la población seleccionada, diagnosticados por una prueba o método analítico dado. Simplificado, se calcula como la fracción entre la suma de verdaderos positivos y verdaderos negativos (muestras correctamente diagnosticadas o detectadas) dividido por el número total de muestras analizadas, expresado en porcentaje. Es un importante parámetro de diagnóstico determinante de la fiabilidad de una prueba de detección o diagnóstico, de peso significativo en la validación de un nuevo ensayo o prueba, pues determina qué prueba o test de interés distingue mejor globalmente, entre las muestras tomadas de plantas sin enfermedad (o no infectadas) y las tomadas en plantas infectadas.

Acrónimo del inglés. En español localizable, accesible, interoperable y reutilizable. Principios JUSTO. Estos principios que se aplican a numerosas bases de datos abiertas de la Unión Europea garantizarán una gestión sólida de los datos, lo que conducirá al descubrimiento y la innovación de conocimientos, y a la posterior integración y reutilización de datos y conocimientos. Se puede aplicar en el contexto de validación de reactivos y protocolos de diagnóstico, selección y preparación de muestras ciegas, selección de pruebas a ensayar y en la gestión de los resultados obtenidos, sin conflicto de intereses.

Obtención de los mismos resultados en igualdad de condiciones y por un mismo operario, en distintas réplicas de un ensayo analítico, de diagnóstico o de otro tipo. Muestra la correlación existente entre medidas repetidas de un carácter cuantitativo en un individuo o prueba, o en individuos o pruebas (individuos genéticamente iguales o prueba con idéntica ejecución experimental). Indica el nivel de concordancia entre los resultados de las réplicas de una muestra dentro y entre las ejecuciones del mismo método analítico en un laboratorio determinado y estima la posibilidad de obtener resultados consistentes en una prueba o método analítico al replicar el análisis de la muestra en el mismo lugar. Constituye uno o de los criterios de validación de pruebas diagnósticas.

Capacidad de una prueba para proporcionar resultados consistentes similares cuando se aplica a alícuotas de la misma muestra analizada bajo diferentes condiciones en ensayos intra e interlaboratorios (con distintos operarios, equipos, ubicación y tiempo de realización). Constituye un criterio de validación de pruebas de diagnóstico.

Grado en que las especiales condiciones de prueba alteradas, como modificaciones en temperatura, volumen, intensidad de lavado, cambio de reactivos, etc., afectan a los valores de rendimiento de la prueba establecidos como su sensibilidad analítica y especificidad analítica. Constituye un criterio de validación.

Menor cantidad de objetivo o diana que se puede detectar de manera fiable. Se calcula para distintos patógenos según los detalles del documento OEPP PM 7/98 (5), “Requisitos específicos para los laboratorios que preparan la acreditación para una actividad de diagnóstico de plagas de plantas”. En el caso de virus, viroides y fitoplasmas (agentes no cultivables in vitro), se analizan al menos ocho muestras en el límite de detección establecido. Estos resultados se pueden combinar con repetibilidad/reproducibilidad y constituyen un criterio para la validación de una prueba o método analítico.

Evaluación de la realización de una o más pruebas por dos o más laboratorios utilizando muestras ciegas definidas.

1. Acción y efecto de validar algo. 2. (recognition). Proceso mediante el cual dos simbiontes potenciales inician una relación simbiótica.

Instrumento diseñado para soportar condiciones de temperatura y presión propia de procesos de tratamientos térmicos como los de pasteurización o esterilización por autoclaves que precisan de un control de la temperatura interna de los productos para así poder validar el proceso.