Diccionario

ARN pequeño inducido por la infección viral con carácter interferente de origen vírico. Comparte características similares con los ARN interferente pequeño (ARNsi) y los ARN micro (miARN) endógenos que median en el silenciamiento génico y, por tanto, son capaces de unirse a complejos efectores de silenciamiento y regular la expresión de genes con secuencias complementarias. En consecuencia, los ARNip o ARN interferente pequeño de origen vírico, dirigen el autosilenciamiento de los mismos ARN pequeños o sARN virales de los que proceden.

Molécula pequeña de ARN (20 a 25 nucleótidos) que se genera por fragmentación de precursores más largos. Suprime la expresión de genes específicos mediante mecanismos conocidos globalmente como ribointerferencia o interferencia por ARN. Se pueden clasificar en tres grandes grupos: ARN interferente pequeño (ARNsi), micro ARN (ARNmi) y ARN asociados a Piwi.

Mecanismo de silenciamiento post-transcripcional de genes específicos, ejercido por moléculas de ARN que, siendo complementarias a un ARN mensajero, conducen a la degradación del mismo. Mecanismo por el cual, una molécula de ARN suprime la expresión de genes específicos mediante mecanismos conocidos globalmente como ribointerferencia o interferencia por ARN.

Molécula artificial de ARN con una curva cerrada o giro apretado de la horquilla, que frecuentemente se utiliza para silenciar la expresión génica a través de ARNi, ya que permite silenciar específicamente ARN mensajeros que se traducen en proteínas responsables de alteraciones o efectos indeseados dentro de la célula, inhibiendo sus efectos.

Proceso por el cual las células eucariotas liberan moléculas grandes para ser usadas por otras células o en diferentes procesos biológicos. Las vesículas portadoras de moléculas específicas y unidas por membranas se fusionan con la membrana plasmática para liberar de la célula, su contenido. La secreción de mucigel por parte de la cofia o caliptra de las raíces, la colocación de los componentes de la pared celular y la liberación de enzimas digestivas en las plantas carnívoras son ejemplos de exocitosis vegetal. También se da en algunas zoosporas, como las de Phytophthora infestans (mildiu de la patata o papa) o P. cinnamomi (podredumbre de la raíz del aguacate o palto). La exocitosis constitutiva es aquella que se produce en todas las células. Las moléculas liberadas ayudan a la formación de la matriz extracelular y para la regeneración de la membrana plasmática. La exocitosis regulada es el proceso de células especializadas en la secreción. Liberan moléculas que realizan funciones específicas en el organismo o afectan la fisiología de otras células o microorganismos.

En microscopía, aquel utilizado para rellenar la muestra o espécimen entre el portaobjetos (en la cual ya está fijada) y el cubreobjetos. Su misión es proteger la muestra o especialmente la delicada sección de tejidos, y suministrar un campo óptico claro. Existe una amplia gama disponible comercialmente, entre los más frecuentemente utilizados, están: Bálsamo del Canadá (actualmente en desuso debido a su alto coste y que se endurece y amarillea con los años), Permout (idóneo por su versatilidad), Merkoglass-EM Glass (apropiado en general y muy utilizado para tinciones con azul nitrotetrazolio-NBT), BioMount (muy utilizado para reacciones con anticuerpos marcados con oro coloidal), Euparal (útil si el tejido, la tinción o la matriz no toleran el xileno, usual en muchas técnicas de inmunolocalización), Gel/Mount (útil en inmunolocalización fluorescente o criosección en fresco), gelatina de glicerina, medio de goma arábiga y glicerol/PBS (muy comunes para muestras frescas), Vaspar (mezcla de vaselina y parafina fundida 1:1) y barniz pintauñas, utilizados estos dos últimos para sellar los bordes de cubreobjetos y evitar evaporación.

Inhibición artificial de la expresión de genes mediante ARN interferente (ARNi). Las ventajas que ofrece su utilización en el control de enfermedades se basan en su gran especificidad, flexibilidad y velocidad. Además, es aplicable a una amplia variedad de organismos, y también permite silenciar al menos dos genes al mismo tiempo.

Técnica para el silenciamiento de genes de la planta mediante interferencia de ARN mediada por secuencias de pequeño tamaño de ARN (generalmente entre 20 y 32 nt). Constituye un avance en el campo que explora el uso de vectores virales para mejorar las características agronómicas de los cultivos, mediante el uso de un virus vegetal benigno o desarmado (virus modificado, al que se ha eliminado el material genético que causa la enfermedad, para convertirlo en vehículo que transporte la secuencia de ARN que se quiere introducir en un organismo). Así se transportan moléculas cortas de ARN a las plantas, desencadenando un proceso de interferencia por ARNi (RNAi) para silenciar genes de manera específica, impidiendo que la información de un gen se traduzca en una proteína. Este enfoque mejora la eficiencia en la reducción de la expresión de genes diana en las plantas y abre nuevas vías para la mejora de cultivos, incluida la de su resistencia a patógenos, la genómica funcional y la agricultura sostenible, basada en la tecnología de vectores virales. Esta tecnología se ha demostrado eficaz, en condiciones experimentales, para inducir la floración y acelerar el desarrollo de variedades mejoradas, modificar la arquitectura vegetal para facilitar la adaptación a la mecanización, mejorar la tolerancia a la sequía y producir metabolitos beneficiosos para la salud humana, entre otras aplicaciones con posibilidad de uso a escala industrial.

Aproximación transgénica que se ha desarrollado para evaluar la función de los genes de agentes patógenos en las plantas. Esta tecnología representa un concepto innovador de tecnología del ARN interferente (ARNi) para el manejo eficiente de patógenos de plantas. Esta estrategia se emplea para silenciar uno o varios de los genes de patógenos importantes que son necesarios para el crecimiento, el desarrollo y la patogenicidad o los genes del huésped o anfitrión necesarios para la infección.

Denominación común de los vehículos que transportan los ARNsi al blanco o diana pretendida. El desarrollo de métodos efectivos para la liberación local o sistémica de ARNsi/ARNsh en organismos vivos, es que sean efectivos en la protección de los oligonucleótidos transportados a la vez que sean eficientes y aseguren la correcta llegada a las células diana. En ellas o en el tejido del organismo receptor, no deben provocar toxicidad u otros efectos no deseados. Actualmente este aspecto, se considera el principal problema a resolver y uno de los retos más importantes para el uso factible del ARNi en la terapéutica sanitaria humana, animal o vegetal.

Grupo heterogéneo de ARNs de naturaleza muy variada, entre los que cabe destacar: i) los ARNsi de acción trans o ARNtasi (trans-acting siRNA, tasiRNA); ii) los ARNsi asociados a transcritos naturales antisentido o ARNnatsi (natural antisense siRNA, natsiRNA); y iii) los ARNsi asociados a repeticiones del genoma o ARNrasi (repeat-associated siRNA, rasiRNA). Son moléculas de ARN bicatenario perfectamente complementarias, de 20-21 nucleótidos con dos nucleótidos desemparejados en cada extremo 3´, con capacidad y efecto de interferir anulando la expresión de un gen concreto. Pueden ser introducidos de forma exógena en las células utilizando métodos de transfección basándose en la secuencia complementaria de un gen en particular, con finalidad de reducir significativamente su expresión. Las infecciones virales en plantas están asociadas con la acumulación de ARN pequeño interferente (ARNsi) virales que pueden, a su vez, actuar silenciando el propio genoma viral. Por esta razón, los virus son tanto inductores como dianas del silenciamiento por ARN. Mientras que en virus de ADN los ARNsiv podrían provenir de ARN bicatenarios (ARNds) generados durante la transcripción bidireccional de sus genomas, en virus de ARN los ARNsiv podrían generarse a partir de ARNds sintetizados durante el proceso de replicación viral.

Proceso de eliminación de ARNm portadores de una mutación terminadora o de una mutación del marco de lectura, que derivan en la creación de codones de finalización precoz de la síntesis de una proteína. De no eliminarse estos ARNm, se producirían polipéptidos defectuosos (incompletos) al ser traducidos. Se trata de un fenómeno asociado a la ribointerferencia.

Enzima que interviene en los procesos de ribointerferencia y de represión de la traducción. Consta de varios dominios, uno con actividad helicasa del ARN, dependiente de ATP (en el extremo amino), un dominio PAZ, dos dominios contiguos con actividad endorribonucleasa III (ARNasa III) en serie y un dominio de unión a ARNbc (en el extremo carboxilo). Desde el punto de vista evolutivo es una enzima muy conservada. Actúa sobre moléculas de ácido ribonucleico de dos tipos: i) ARNbc de 100 o más pares de bases. En este caso, la enzima divide el ARNbc en fragmentos regulares de 21 a 25 pares de bases conforme se va desplazando a lo largo de la molécula; este proceso requiere energía (ATP). Los fragmentos resultantes se denominan ARN interferentes pequeños (ARNsi) (small interfering RNA) y son indispensables para la degradación de ARNm invasores o aberrantes en el fenómeno de la ribointerferencia; o ii) ARN en forma de horquilla de aproximadamente 70 nucleótidos (ARNhc). En este segundo caso, la enzima escinde la horquilla y las zonas no apareadas del ARN horquillado, y libera un fragmento monocatenario de 21 a 23 nucleótidos. Este fragmento se denomina ARN temporal pequeño (small temporal RNA o ARNst) y es indispensable para la regulación postranscripcional de algunos ARNm endógenos.