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SUMA

Acrónimo de Sistema Ultra Micro Analítico, un tipo de ELISA patentado en Cuba y realizado con pequeños volúmenes del orden de diez microlitros por pocillo, para detección de antígenos o de anticuerpos. Se trata de una reacción rápida y automatizada que tiene como finalidad la economía de tiempo y reactivos.

área demarcada

Aquella cuyos límites han sido señalados por la autoridad fitosanitaria por ser en la que se halla presente un organismo nocivo concreto o sus vectores y que incluye la zona infectada o infestada (de radio variable) y una zona tampón, también de tamaño variable, según las enfermedades. En dicha zona tampón se deben efectuar prospecciones para redefinir el área demarcada si fuera necesario. En algunos casos, se considera zona demarcada al área resultante de sumar la parcela afectada más la zona tampón que estará conformada por todas aquellas parcelas que se encuentren en un polígono, en su totalidad o en parte, dentro de un radio definido para cada caso alrededor de las parcelas con material vegetal infectado, o infestadas por vectores.

cabina de seguridad biológica, CSB

Equipo diseñado para proteger al trabajador, la atmósfera del laboratorio y los materiales de trabajo de la exposición a las salpicaduras y aerosoles infecciosos que pueden generarse al manipular material que contiene agentes infecciosos, como cultivos, soluciones madre y muestras. Generalmente se producen aerosoles en cualquier actividad que transmita energía a un material líquido o semilíquido, por ejemplo, al agitar, verter a otro recipiente, remover o verter sobre una superficie o sobre otro líquido. Las actividades como la siembra de placas de medio sólido con agar, la inoculación de frascos de cultivo celular con pipeta, el uso de pipetas múltiples para dispensar suspensiones líquidas de agentes infecciosos en placas de microcultivo, la homogeneización y la agitación vertical de material infeccioso, y la centrifugación de líquidos infecciosos, las inoculaciones o el trabajo con animales o plantas, pueden generar aerosoles. Las partículas de aerosol de menos de cinco μm de diámetro y las gotículas de cinco a 100 μm de diámetro no son visibles a simple vista. El operario no suele percatarse de que se están produciendo esas partículas, que pueden ser inhaladas o provocar contaminación cruzada de los materiales que se encuentran sobre las superficies de trabajo. Las CSB, cuando se utilizan debidamente, han demostrado ser sumamente eficaces para reducir las infecciones en el laboratorio y la contaminación cruzada de cultivos por exposición a aerosoles y también protegen la atmósfera del laboratorio. Contienen un filtro HEPA (retiene el 99,97 % de las partículas de 0,3 m de diámetro y el 99,99 % de las partículas de tamaño mayor o menor), lo que garantiza que de la cámara solo sale aire exento de microorganismos. Además, se dirige hacia la superficie de trabajo aire que también ha pasado por filtros HEPA, con el fin de proteger de la contaminación los materiales de esa superficie. Las cabinas de flujo horizontal y vertical no son CSB y no deben emplearse como tales con organismos de riesgo según la legislación de la Unión Europea.

cascabeleo del tabaco

Denominación común de la enfermedad causada por el virus del cascabeleo del tabaco (Tobacco rattle virus-TRV), familia Virgaviridae, género Tobravirus, especie Tobravirus tabaci, ampliamente distribuido en diferentes zonas geográficas. Posee una amplia gama de huéspedes o anfitriones que abarca tanto monocotiledóneas como dicotiledóneas. En patata o papa, produce arcos necróticos profundos en la carne del tubérculo, que pueden transparentarse a través de la piel. Los síntomas foliares son infrecuentes, y consisten en un moteado severo que afecta a parte de los tallos de la mata. Es transmitido en la naturaleza por nematodos del género Trichodorus sp., la especie del vector está ligada a la raza del virus presente. La patata o papa no es un buen anfitrión, pues se presenta con frecuencia defectivo en ARN 2 y, por tanto, no encapsidado (formas NM). Estas formas no son transmisibles por nematodos, de forma que se rompe el ciclo epidemiológico. Tampoco se transmite bien a todos los tubérculos hijos, tendiendo a desaparecer en la descendencia. Por el contrario, en las variedades asintomáticas de patata o papa, el virus se replica completamente y son fuente de transmisión para los nematodos. Incluso en este caso, el vector no sobrevive el transporte en la patata de siembra y es necesario que en el campo de destino se encuentre la especie de nematodo adecuada al patotipo del virus. A pesar de esta difícil contaminación por la patata o papa de siembra, una vez presente en una parcela es casi imposible de erradicar, ya que tanto el virus como el vector son sumamente polífagos y se perpetúan en otros cultivos y malas hierbas o malezas, en las que se transmite por semilla. Presente esporádicamente en España.

contaminante

1. Sustancia, microorganismo o su ADN o ARN, no deseados y extraños en el medio en que se encuentran. Normalmente tienen propiedades nocivas o degradantes para el medio considerado, o inhibitorias de la reacción, técnica de detección o diagnóstico empleada, o incluso pueden inducir en la misma falsos positivos o negativos. 2. Pequeña cantidad de determinada sustancia o compuesto presente en el ambiente o en un producto que debe ser tenido en cuenta por personas que lo consuman como alimento.

dosis efectiva, E

Magnitud que mide la dosis absorbida de radiación ionizante, definida por una fórmula que considera la suma de las dosis equivalentes en tejido, multiplicada cada una por el factor de ponderación para el tejido humano correspondiente. Es un indicador cuantitativo de la probabilidad de que pueda ocurrir un efecto estocástico, generalmente cáncer, sobre una persona irradiada a cuerpo completo. La unidad de la dosis efectiva es el sievert (Sv).

error total

Suma de los errores aleatorios y sistemáticos.

especificidad

1. Cualidad de específico. 2. Parámetro que informa sobre la capacidad de identificar correctamente los verdaderos negativos. Se define como la proporción de verdaderos negativos de entre todos los negativos detectados—es decir, el cociente entre los verdaderos negativos divididos por la suma de verdaderos negativos más falsos positivos—. 3. Capacidad de una enzima para catalizar únicamente un tipo particular de reacción, utilizando un número limitado de sustratos. 4. Capacidad de actuar, reconocer, reaccionar, aparearse, fecundar, etc., con un tipo único de diana, producto, microorganismo, anticuerpo, polen, etc.

irradiancia espectral

Magnitud utilizada para describir la potencia incidente por unidad de superficie de todo tipo de radiación electromagnética. Poniendo como ejemplo a la radiación solar que llega a la superficie de la tierra, tendrá una distribución espectral distinta a la existente fuera de la atmósfera debido no solo a la absorción y reflexión, sino también a otros factores (altitud del lugar, zona geográfica, etc.). La radiación solar global recibida en cualquier localidad tiene una componente directa y una componente difusa. La radiación que incide sobre una superficie directamente del sol, sin sufrir cambios de dirección, se conoce como radiación directa. La que llega después de ser reflejada, o incluso la radiación infrarroja emitida por las moléculas después de sufrir un calentamiento por efecto de absorción de radiación solar, se conoce como radiación difusa. La componente difusa puede variar desde un 20 % sobre el globo terrestre en un día claro a un 100 % en un día nublado. La suma de estas dos componentes en un plano horizontal se denomina radiación global.

límite de dosis de radiación ionizante

Aquel fijado por las autoridades legales para la dosis, por las radiaciones ionizantes a los trabajadores, estudiantes y miembros del público, excluyendo las dosis debidas a la radiación por el fondo natural y a la exposición médica. Los límites de dosis se aplican a la suma de las dosis recibidas por exposición externa durante un período determinado y la dosis interna integrada resultante de la incorporación de radionucleidos, durante el mismo período.

longitud genética

Suma de las distancias genéticas entre los locus de un cromosoma.

medioambiente

Conjunto de circunstancias y condiciones exteriores a un ser vivo que influyen en su desarrollo y actividades. Suma de las propiedades biológicas, químicas y físicas que rodean a los organismos.

nomograma

Representación gráfica que permite realizar con rapidez cálculos numéricos aproximados. Artefacto o instrumento de cálculo que sirve para efectuar operaciones aritméticas sencillas (sumas, restas y multiplicaciones). Consiste en un cuadro de madera con barras paralelas por las que corren bolas movibles, útil también para enseñar estos cálculos simples. Diagrama bidimensional que permite el cómputo gráfico y aproximado de una función de cualquier número de variables. Utilizado frecuentemente en las estaciones de avisos y laboratorios de diagnóstico antes de la implantación de calculadoras electrónicas.

peso molecular

Suma de los pesos atómicos que entran en la fórmula molecular de un compuesto.

precisión diagnóstica

Representa la proporción de resultados verdaderos (tanto positivos como negativos verdaderos) en la población seleccionada, diagnosticados por una prueba o método analítico dado. Simplificado, se calcula como la fracción entre la suma de verdaderos positivos y verdaderos negativos (muestras correctamente diagnosticadas o detectadas) dividido por el número total de muestras analizadas, expresado en porcentaje. Es un importante parámetro de diagnóstico determinante de la fiabilidad de una prueba de detección o diagnóstico, de peso significativo en la validación de un nuevo ensayo o prueba, pues determina qué prueba o test de interés distingue mejor globalmente, entre las muestras tomadas de plantas sin enfermedad (o no infectadas) y las tomadas en plantas infectadas.

QTL

Sigla del inglés. En español, locus de carácter cuantitativo. Es por tanto una región de ADN que codifica uno o varios genes asociados con un rasgo fenotípico particular, que varía en grado y que puede atribuirse a efectos poligénicos (producto de dos o más genes y su entorno). Posee gran importancia para la identificación y caracterización de genes de resistencia a virus y otros microorganismos fitopatógenos en plantas. Los denominados QTL son un grupo de genes de efecto individual escaso pero aditivo, localizados en una o varias regiones cromosómicas, que regulan la expresión de un fenotipo con distribución continua, en contraposición a los genes mendelianos de fenotipos discretos (ausencia o presencia). Muchos fenotipos se deben a la contribución aditiva de diversos genes (denominados QTL). La contribución de los QTL al fenotipo es cuantitativa y compleja ya que, por ejemplo, pueden tener efectos positivos o negativos, puede haber interacciones entre dos o más QTL (epistasis), o su actividad puede estar determinada epigenéticamente. En consecuencia, ciertos fenotipos pueden dar lugar a una segregación transgresiva (aquella en la que el fenotipo de los descendientes alcanza valores extremos, con respecto al fenotipo de los parentales), como la resistencia a patógenos. Estudios recientes de germoplasmas de especies cultivadas indican que en los genomas vegetales existen centenares de QTL que codifican para resistencia parcial a diversas enfermedades de plantas. Conceptualmente todas las plantas cuentan con un cierto nivel de resistencia cuantitativa y parcial superpuesta sobre la resistencia cualitativa mono/oligogénica, que aparentemente es suma de la defensa residual que permanece en la planta después de que las resistencias cuantitativa (resistencia horizontal, no específica de raza) y cualitativa (resistencia vertical, específica de raza) hayan sido superadas.

sinergia

1. Acción de dos o más causas cuyo efecto es superior a la suma de los efectos individuales. 2. Concurso activo y concertado de varios órganos para realizar una función o de dos o más patógenos, cuyo efecto es superior a la suma de los efectos patogénicos individuales, como ocurre en muchas infecciones mixtas sinérgicas de especies del mismo patógeno o de diferentes.

sinergismo

Interacción o acción de dos o más sustancias o compuestos, microorganismos, agentes o estímulos, que cuando actúan conjuntamente logran un efecto real mayor que el de la suma de sus efectos por separado.

sintrofia

1. Fenómeno microbiológico por el cual se establece una interacción entre dos organismos diferentes cuando estos se extienden sobre el mismo medio de manera que las actividades combinadas son cualitativa o cuantitativamente diferentes de la suma total de las actividades individuales, cuando se expresan por separado y en las mismas condiciones. 2. Fenómeno o relación simbiótica estrictamente mutualista de una especie que vive o aprovecha los productos metabólicos de otra especie. En este tipo de interacción biológica, el desarrollo y crecimiento de uno de los organismos simbiontes depende de los nutrientes, factores de crecimiento o sustratos proporcionados por el otro socio. Se da muy frecuentemente entre especies bacterianas.

variegación de los cítricos

Denominación común de la enfermedad causada por Citrus leaf rugose virus (CiLRV) de la familia Bromoviridae, género Ilarvirus, especie Ilarvirus CLRV. Estos virus poseen genoma tripartito y heterocapsídico. Se transmite por injerto y otras propagaciones vegetativas, mecánicamente por herramientas de corte, por polen y en bajos porcentajes por semilla. Afecta a casi todas las especies de cítricos. Provoca, en general, una ligera reducción del tamaño del árbol. No obstante, algunos aislados presentes en Córcega (Francia) son capaces de causar un acusado enanismo en árboles de mandarino satsuma. La cepa que produce la variegación infecciosa es capaz de deformar frutos causando en mandarino satsuma, naranjo dulce Hamlin y pomelos daños importantes, mientras que la que produce el síndrome de abolladura de las hojas no deforma los frutos, pero puede inducir en limonero frutos de pequeño tamaño, bastos y desiguales. El síntoma más evidente y frecuente es la presencia de hojas rugosas y jaspeadas sin deformación de hojas ni frutos. Presente en España en plantaciones antiguas.

virus del aclarado de venas de los cítricos

Denominación común de la enfermedad causada por el virus emergente, Potexvirus citriflavivenae, de la familia Alphaflexiviridae, género Potexvirus, subgénero Mandarivirus. Todas las especies de cítricos pueden infectarse, pero los daños más graves se producen en limonero, naranjo amargo y lima persa. Los síntomas más característicos de la enfermedad aparecen en las hojas y consisten en una pronunciada clorosis o aclarado de las venas o nervaduras de color amarillo que se observa principalmente en los nervios secundarios. La infección también induce abolladuras y abarquillamiento de las hojas y, ocasionalmente, manchas cloróticas en forma de anillo y oscurecimiento y necrosis de los nervios en el envés de las hojas. También se ha descrito la aparición de síntomas en frutos, como manchas en forma de mosaico, y en mandarino satsuma se han observado deformaciones consistentes en depresiones en forma de surco que comienzan en la parte superior del fruto y le dan un aspecto de calabaza. En casos de infección grave, los árboles muestran síntomas de decaimiento, pudiendo morir, y el rendimiento y calidad de la fruta disminuyen considerablemente. Debido al debilitamiento de la planta y menor vigor, cuajado y calidad del fruto, puede causar pérdidas económicas importantes en plantaciones de cítricos, en especial de limoneros. Los cultivares de mandarinos o híbridos, como clementina, satsuma y zamboa tienen una susceptibilidad moderada. Los de naranjo, algunos de mandarino, kumquat y cidro presentan una susceptibilidad baja y casi todos los de lima, mandarino y pomelo son tolerantes a la enfermedad, porque se infectan con el virus y pueden transmitirlo, pero no manifiestan síntomas. Se ha detectado en plantas silvestres como Malva sylvestris y Solanum nigrum, entre otras, y se ha descrito en vid. Huéspedes experimentales son: Phaseolus vulgaris, Vigna unguiculata, Chenopodium quinoa y Nicotiana benthamiana. En el ámbito de la citricultura, se transmite mediante injerto u otra propagación vegetativa de material infectado y mecánicamente por herramientas de corte de poda y recolección. También se transmite de forma natural por insectos vectores, como por especies de pulgones muy comunes (Aphis spiraecola, A. craccivora, A. gossypii) y por la mosca blanca Dialeurodes citri. El virus se detectó por primera vez en Pakistán en 1988, y actualmente está presente en Asia oriental (India, China, etc.), Irán, EE.UU., Turquía e Italia y se disemina por la zona mediterránea de la EPPO. Presente en España.

xiloporosis

Denominación común de la enfermedad denominada caquexia (cachexia) o xiloporosis de los cítricos. La xiloporosis, en su primera descripción suponía la aparición de acanaladuras en la madera de la lima dulce de Palestina empleada como patrón. La caquexia, inicialmente descrita en tangelo Orlando, se caracteriza por la presencia de acanaladuras en la cara cambial de la madera y proyecciones en la corteza con fuerte impregnación de goma. Aunque el término caquexia es el que se ha propuesto como recomendado, y está aceptado en foros internacionales, en los países de la cuenca del Mediterráneo, xiloporosis es el nombre que se utiliza más comúnmente. La enfermedad está causada por el mismo viroide, una variante del Hop stunt viroid-HSVd (viroide del enanismo del lúpulo), familia Pospiviroidae, género Hostuviroid, cuyo tamaño oscila entre 294 y 303 nucleótidos. Las variantes de HSVd identificadas en cítricos se han denominado CVd-II (viroide II de los cítricos). Sin embargo, mientras que algunas de las variantes de este viroide son agentes causales de la caquexia, otras con similitud de secuencia muy elevada con las anteriores no producen la enfermedad. Se han descrito numerosas variantes de HSVd en lúpulo, pepino, vid, rosal y varios frutales (Cucumber pale fruit viroid, Citrus cachexia viroid, Peach dapple viroid y Plum dapple viroid). Son sensibles a la caquexia los patrones de cítricos Citrus macrophylla y lima Rangpur, y todos los clementinos, satsumas, mandarinos e híbridos de mandarinos sobre cualquier patrón. Cualquier especie y variedad injertada sobre un patrón sensible como C. macrophylla, es un árbol sensible a la caquexia. La enfermedad se ha descrito en prácticamente todos los países citrícolas del mundo. Los árboles muestran un amarilleamiento progresivo de la copa seguido de pérdidas de follaje, detención del crecimiento y finalmente se produce la muerte del árbol. La unión del injerto, que en árboles sanos es lisa, presenta en los infectados un miriñaque considerable en la parte superior, debido a la detención del crecimiento en diámetro del patrón. Al levantar la corteza del patrón, y a veces incluso desde el exterior, se observan marcadas acanaladuras en la madera que se corresponden con proyecciones de la corteza que con frecuencia están impregnadas de goma. La corteza es muy delgada y suele estar también impregnada de goma. Se transmite por injerto y otras propagaciones vegetativas, no se conocen agentes vectores pero la enfermedad puede trasmitirse mecánicamente mediante herramientas de corte y poda.

ELISA

Denominación común en español, que proviene del acrónimo del inglés “Enzyme-Linked Immunosorbent Assay”, o ensayo inmunoenzimático en fase sólida o ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas, popularmente ELISA. Da nombre a una técnica inmunológica o ensayo inmunoenzimático o serológico muy sensible para detectar, cuantificar, identificar o comparar antígenos complejos (agentes patógenos), proteínas, anticuerpos, péptidos u hormonas, incluso en extractos vegetales brutos. Esta prueba se caracteriza por utilizar un soporte insoluble o inmunoadsorbente (microplacas, tubos, pocillos o membranas) para fijar, tapizar o sensibilizar con antígenos o anticuerpos, según la modalidad de técnica. La prueba consiste en una serie de incubaciones mediadas por lavados, hasta adicionar el substrato. Se caracteriza porque la reacción se revela con anticuerpos conjugados enzimáticamente (frecuentemente en Patología vegetal con fosfatasa alcalina de mucosa intestinal de ternera y en ocasiones con peroxidasa de rábano picante) o biotinilados y un sustrato apropiado a la enzima marcadora (p-nitrofenil fosfato en el caso de la fosfatasa alcalina y peróxido de hidrógeno para la peroxidasa). La densidad óptica o valor ELISA final es proporcional a la cantidad de antígeno o anticuerpo detectado y permite asignar un valor numérico a la detección semicuantitativa. Se han diseñado distintas variantes o modalidades: ELISA directo, indirecto, de doble sándwich de anticuerpos (DAS), indirecto doble sándwich de anticuerpos (DASI), y competición. Las modalidades pueden realizarse con anticuerpos policlonales, con anticuerpos monoclonales, con anticuerpos recombinantes o con fragmentos F(ab´)2 de anticuerpo y proteína A conjugada. La técnica ELISA puede realizarse con sustratos solubles o precipitantes.

ELISA de microfluidos

Inmunoensayo que se produce en la superficie de una cámara de reacción representada por un canal de microfluidos. La fuerza capilar dentro del microcanal atrae a los reactivos en la cámara de reacción y también facilita la incubación del ensayo. Una almohadilla subyacente absorbe automáticamente el exceso de líquido, siendo la única operación requerida la carga secuencial de tampones y reactivos. El volumen de muestra es de 10 L y el uso de reactivos es de 5 a 10 veces menor comparado con una técnica ELISA convencional. Se ha aplicado a varios virus de plantas.

ELISA doble sándwich de anticuerpos, ELISA-DAS

Variante de ELISA muy sensible para detección de antígenos complejos (agentes patógenos). De manera secuencial y mediada por etapas de incubación y lavado, se tapizan los pocillos de una microplaca o la superficie de un inmunoadsorbente con anticuerpos purificados específicos del agente patógeno a detectar, se añade la muestra (extracto bruto vegetal, suspensión bacteriana, dilacerado, exudados, lloros de vid, extracto de suelo filtrado, etc.), y se añaden los mismos anticuerpos que en la primera etapa, pero conjugados con una enzima (habitualmente fosfatasa alcalina). La reacción se revela con el substrato específico de la enzima marcadora (habitualmente p-nitrofenil fosfato) que por hidrólisis y efecto batocrómico producirá un color amarillo (valor ELISA a 405 nm) de intensidad proporcional a la enzima retenida. La reacción clásica y más sensible, se realiza añadiendo 200 L/pocillo de la microplaca en cada etapa, aunque para ahorro de reactivos y economía algunos kits comerciales utilizan solo 100 L/pocillo. Otras modalidades utilizan únicamente unos microlitros Los anticuerpos utilizados para tapizar o como conjugados pueden ser producidos en la misma especie animal o no. Frecuentemente se utilizan anticuerpos policlonales para tapizado y monoclonales específicos (solos o en mezcla de varios) como conjugados, o ELISA basado completamente en anticuerpos policlonales, en anticuerpos monoclonales o recombinantes de anticuerpos monoclonales, que confieren alta especificidad y sensibilidad. DAS es la modalidad más popular de ELISA para detección de agentes patógenos o sus metabolitos.

placa de ELISA

Recipiente estándar en investigación y laboratorios de diagnóstico, de 127,6 x 85,75 mm, adaptado a la automatización y pipetas múltiples. Diseñada con 96 pocillos en forma de tubo de fondo plano, de capacidad máxima 350 L, aunque se fabrican de menor volumen/pocillo para técnicas ELISA de formato especial, Su formato es de 12 columnas de pocillos, numeradas de 1 a 12 y de ocho filas, marcadas con letras de A a H. Su fondo es generalmente plano para permitir lectura espectrofotométrica a través del contenido del pocillo (espesor estándar del fondo 1,20 mm), aunque existen disponibles de fondo en U y en V. Fabricada con poliestireno rígido de gran claridad (también está comercialmente disponible en policloruro de vinilo-PVC flexible o rígida). Las placas se distribuyen con o sin tapa, estériles o no, de alta o baja adherencia y empaquetadas individualmente o en otros formatos, generalmente de cinco placas/paquete.

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