Aquel que está formado por dos hebras complementarias. Puede aparecer en muchos tipos de organismos (virus de genoma ARN bicatenario; viroides, etc.). Es también una forma replicativa transitoria de virus. Se ha utilizado su perfil electroforético para caracterizar algunos virus y diferenciar sus aislados. Algunas plantas no infectadas por virus pueden contener ARN de doble cadena de función desconocida.
prueba de ARN de doble hebra, ARNds
Ensayo utilizado en virología para diagnóstico, detección, comparación e identificación. Se basa en que el genoma de la mayor parte de los virus de plantas está constituido de ARN y durante la replicación viral, se producen moléculas de ARNds como forma replicativa del virus. Se han utilizado patrones electroforéticos de segmentos de ARNds visualizados en geles de acrilamida para diferenciar Closterovirus, para caracterizar aislados del virus de la tristeza de los cítricos (Closterovirus tristezae, Citrus tristeza virus-CTV) y para discriminar plantas de olivo sanas de las infectadas por virus, entre otros ejemplos. Los inconvenientes de este método son su baja sensibilidad y especificidad y la laboriosidad del proceso, que impide su uso a gran escala. Actualmente se utiliza secuenciación masiva para comparar los genomas virales con mayor precisión.
ARN interferente pequeño, ARNsi o ARN interferente pequeño viral, ARNsiv
Grupo heterogéneo de ARNs de naturaleza muy variada, entre los que cabe destacar: i) los ARNsi de acción trans o ARNtasi (trans-acting siRNA, tasiRNA); ii) los ARNsi asociados a transcritos naturales antisentido o ARNnatsi (natural antisense siRNA, natsiRNA); y iii) los ARNsi asociados a repeticiones del genoma o ARNrasi (repeat-associated siRNA, rasiRNA). Son moléculas de ARN bicatenario perfectamente complementarias, de 20-21 nucleótidos con dos nucleótidos desemparejados en cada extremo 3´, con capacidad y efecto de interferir anulando la expresión de un gen concreto. Pueden ser introducidos de forma exógena en las células utilizando métodos de transfección basándose en la secuencia complementaria de un gen en particular, con finalidad de reducir significativamente su expresión. Las infecciones virales en plantas están asociadas con la acumulación de ARN pequeño interferente (ARNsi) virales que pueden, a su vez, actuar silenciando el propio genoma viral. Por esta razón, los virus son tanto inductores como dianas del silenciamiento por ARN. Mientras que en virus de ADN los ARNsiv podrían provenir de ARN bicatenarios (ARNds) generados durante la transcripción bidireccional de sus genomas, en virus de ARN los ARNsiv podrían generarse a partir de ARNds sintetizados durante el proceso de replicación viral.
hipovirulencia
1. Virulencia reducida de una cepa patogénica de un virus debida a la presencia de un ARN de doble cadena (ARNds) transmisible. Las cepas bacterianas también pueden presentar variabilidad en su virulencia, y generalmente se describen como hipovirulentas, hipervirulentas y avirulentas. 2. Reducción de la virulencia en hongos, debida a la infección por micovirus entre otras causas. Por ejemplo, en castaño son conocidos algunos micovirus que reducen la virulencia de Cryphonectria parasitica agente causal de la enfermedad del tizón del castaño, y otros que producen alteraciones fenotípicas en su hongo anfitrión Fusarium oxysporum f. sp. dianthi.
silenciamiento génico inducido por pulverización
Técnica de aplicación tópica de ARN de doble cadena (ARNdc, ARNds o dsRNA) sobre material vegetal, dirigido contra genes del agente patógeno, con la finalidad de controlar enfermedades mediante el mecanismo de interferencia de ARN. Para paliar la rápida degradación del ARNdc pulverizado en el ambiente, debido a la acción de nucleasas, se han utilizado vesículas artificiales de lípidos catiónicos para encapsularlo ya que, además de protegerlo, mejoran su adherencia al material vegetal. También se ha utilizado ARNdc adsorbido en arcilla, con el mismo fin. Esta tecnología ha demostrado la efectividad de la protección contra el hongo Botrytis cinerea en material vegetal en campo y durante la poscosecha de uva, tomate, lechuga y pétalos de rosa. La tecnología se ha aplicado para el control de moscas blancas vectoras y supresión de la resistencia a insecticidas de Diaphorina citri, del vector de la enfermedad del huanglongbing (HLB) de los cítricos. Se ha demostrado también su utilidad protectora frente al hongo Fusarium graminearum y frente a distintos virus.
silenciamiento génico mediado por ARN
Mecanismo natural de defensa antiviral que es activado en presencia de ARN de doble cadena (ARNds), dando lugar a la degradación del ARN viral en un proceso dependiente de homología de secuencia entre el ARNds inductor y el ARN diana. Este descubrimiento ha abierto la posibilidad de desarrollar nuevas aproximaciones biotecnológicas para introducir inductores de esta respuesta de defensa en la planta y, de esta manera, interferir con la replicación, multiplicación y diseminación del agente infeccioso viral. Este mecanismo implicado en la regulación de la expresión génica también funciona como defensa antiviral en plantas. Es un sistema de regulación mediado por ARNs pequeños que causan la inhibición o supresión de moléculas de ácidos nucleicos a través de interacciones específicas. Este proceso está altamente conservado en organismos eucariotas, donde está presente en plantas, hongos y animales.
silenciamiento génico postranscripcional
Aquel que se manifiesta en plantas de forma experimental cuando un ARN de doble cadena (ARNds) correspondiente a un gen endógeno es introducido en células, produciéndose una inhibición de la expresión fenotípica de ese gen diana de manera específica y altamente efectiva. El mecanismo está mediado principalmente por ARNsi y ARNmi. El mecanismo general se inicia con la síntesis de los pre-ARNsi y pre-ARNmi en el núcleo y su maduración. Debido a que la maquinaria celular responsable de este fenómeno está conservada evolutivamente en eucariotas, el método ha sido adaptado para el análisis genético en organismos tan diversos como plantas, nematodos, insectos y mamíferos.