Diccionario

1. Conjunto de células o individuos genéticamente idénticos, que proceden por mitosis o fisión binaria de un antepasado común o de plantas genéticamente idénticas obtenidas por multiplicación vegetativa. 2. Réplicas de ADN obtenidas por ingeniería genética.

1. Acción y efecto de clonar. 2. En su sentido más amplio, técnica que tiene como finalidad generar copias idénticas de individuos, tejidos, células o ADN. En plantas se realiza por estacas, esquejes, injerto (sistemas asexuales de multiplicación). Para genes se realiza insertando un gen de un organismo (ADN exógeno), en el material genético de un portador denominado vector (células bacterianas, levaduras, virus, plásmidos). Una vez insertado el gen, el vector se somete a condiciones controladas de laboratorio, que promueven su multiplicación, con lo que se logra que el gen deseado se copie muchas veces. En el caso de bacterias, hongos u oomicetos, se procede a su cultivo puro partiendo de una o pocas células iniciales, para generar un clon o colonia.

Aquel producido por la tecnología de hibridomas desarrollada por Georges Khöler y César Milstein (1975), mediante el cultivo de un solo tipo de células híbridas entre un linfocito B de un animal inmunizado y células de mieloma de crecimiento continuo in vitro. Por tanto, está constituido por una sola especie o isotipo de inmunoglobulina, que proviene de un único clon, es totalmente específico del epítopo que lo originó y homogéneo. Los hibridomas productores de anticuerpos pueden mantenerse indefinidamente congelados en nitrógeno líquido ya que los anticuerpos segregados en cultivo in vitro, mantienen sus características en el tiempo.

Planta de la cual se origina un clon. Puede proceder de semilla o de propagación vegetativa.

1. Porcentaje de clones correctos obtenidos en una reacción de clonación. 2. Eficiencia de transferencia nuclear de ADN.

Planta regenerada a partir de cultivos celulares derivados de meiosporas, gametos o gametofitos.

Aquel propagado vegetativamente y procedente de una misma planta madre. En caso de certificación la planta madre debe ser conocida y estar localizada.

La generada por la actividad de un sistema de baja presión, según definición del Diccionario de Ciencias Hortícolas de la SECH. En las borrascas de las latitudes medias, gran parte de la precipitación ciclónica es de carácter frontal.

Denominación común de planta regenerada a partir de un protoplasto. Generalmente adquiere algunas características fenotípicas diferentes a las de la planta madre donante del protoplasto original.

Conjunto de moléculas de ADN idénticas que resulta de una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) o cualquier otro proceso que dé lugar a la producción de diferentes copias de ese fragmento concreto. Es esencialmente un clon molecular.

Técnica muy utilizada para establecer un vínculo entre la evidencia biológica y un sospechoso en una investigación criminal, que también se utiliza en identificación y taxonomía fitopatológica para establecer si dos muestras de ADN son iguales o no. Una muestra de ADN se puede comparar con otra para evaluar si los perfiles coinciden y asignar un porcentaje de identidad. Dos individuos u organismos clonados pueden ser estudiados para determinar si poseen partes en común y, por tanto, se superponen entre sí. La prueba también se utiliza para establecer la paternidad.

Técnica que se basa en la realización de diluciones sucesivas de una suspensión celular, hasta conseguir una alícuota que contenga una sola célula. Se utiliza fundamentalmente en la obtención de anticuerpos monoclonales y en otros procesos de obtención de cultivos o líneas puras.

Estudio químico y bioquímico de los sueros, especialmente del antisuero de animales inmunizados (antisuero), que incluye a los anticuerpos monoclonales específicos y anticuerpos recombinantes, y su uso para detectar, cuantificar o identificar antígenos o anticuerpos.

Antígeno específico y común o conservado en un cierto grupo de virus. Con el mismo se pueden preparar anticuerpos monoclonales o recombinantes totalmente específicos del grupo de virus determinado. Se han localizado en numerosos grupos de virus antígenos específicos de grupo, como un anticuerpo monoclonal (PTY 1) que reconoce a un mayoritario grupo de potivirus transmitidos por pulgón, o aquel anticuerpo monoclonal (MCA13) que reacciona básicamente con aislados agresivos del virus de la tristeza de los cítricos (Closterovirus tristezae, Citrus tristeza virus-CTV).

Antígeno específico y muy conservado en ciertos tipos de virus. Con el mismo se pueden preparar anticuerpos monoclonales o recombinantes totalmente específicos del tipo de virus concreto, como aquellos 4DG11, que reaccionan contra aislados Dideron (D) del virus de la viruela del ciruelo (Potyvirus plumpoxi, Plum pox virus-PPV) o sharka tipo D, o el anticuerpo monoclonal AL, que reacciona frente a tipos agresivos Marcus de PPV-M o aquellos específicos de otros tipos de PPV.

Suero completo o fracción de inmunoglobulinas de la sangre de un animal inmunizado. Las inmunoglobulinas de un antisuero tienen un origen policlonal, pues son producidas por distintos linfocitos, en contraposición con el origen y la definición de anticuerpo monoclonal.

Aquel obtenido de un antígeno determinado (patógeno específico) y que contiene anticuerpos que inicialmente reaccionarán contra él. Únicamente un máximo del 10 % de las inmunoglobulinas de un antisuero (anticuerpos policlonales) reaccionarán específicamente frente al antígeno inmunizante, el resto (gran mayoría) serán parte del patrimonio inmunitario del animal inmunizado, pero no reaccionarán frente al antígeno de interés. Por tanto, un antisuero homólogo garantiza reacción preferente frente al antígeno homólogo, pero no única debido a las frecuentes reacciones cruzadas con otros antígenos.

Sigla del inglés. En español, Colección Americana de Cultivos Tipo. Alberga una amplia colección de microorganismos de referencia disponibles bajo petición, suministro de permisos oficiales de importación y pago de tasas. Es muy útil para comparaciones, validaciones y controles con fines de detección, diagnóstico e identificación. Mantiene en cultivo hibridomas segregantes de anticuerpos monoclonales de interés fitopatológico, que cede para uso científico.

Método de aislamiento de uno varios genes cromosómicos basado en la construcción previa de un denso mapa físico de marcadores moleculares circunvecinos del gen de interés. Tras la construcción de la genoteca genómica respectiva, el gen simplemente se aísla utilizando como sonda uno o más de dichos marcadores, para localizar el o los clones que contienen el gen.

Bacteriófago o fago es un término general para denominar a virus aislados de bacterias; algunos autores también utilizan el término para denominar a virus que infectan a arqueas, aunque esta acepción es controvertida. Su cápsida puede ser icosaédrica, constar de cabeza-cola, ser de tipo bastoncillo (filamentosa), o de otros tipos, y sus genomas constar de ADN o ARN y contener un número muy variable de genes. Se subdividen según sus propiedades bioquímicas o morfológicas. Un tipo de fago concreto suele infectar únicamente a una gama limitada de huéspedes o anfitriones sensibles. Infectan bacterias mediante inyección de su ácido nucleico en la célula anfitriona utilizando la maquinaria biológica de la bacteria para su reproducción. Hay dos tipos: líticos (bacteriófagos virulentos) y lisogénicos (bacteriófagos temperados), según que la infección produzca un cambio en el metabolismo bacteriano que lo lleve a la producción de nuevos bacteriófagos tras la lisis celular, o que el ADN vírico se inserte en el cromosoma bacteriano y se reproduzca con él, en forma de profago, sin destruir la célula bacteriana. Algunos se utilizan en el control biológico de bacterias fitopatógenas (también en medicina frente a bacterias multirresistentes a antibióticos), como vectores de clonación para insertar ADN dentro de las bacterias y obtener como resultado bibliotecas genómicas o genotecas de ADN recombinante (uno de los fagos más utilizados para este fin es el fago λ). Las genotecas combinatorias de anticuerpos se generan mediante la técnica de despliegue en fagos filamentosos o en bacterias. Los más importantes por sus aplicaciones biotecnológicas son el bacteriófago o fago λ (lambda), el fago 29 (phi29) y el bacteriófago M13 (que ha dado derivados fagémidos), muy utilizados como vectores de clonación.

Técnica de tratamiento de semillas que combina aspectos biológicos (inoculación de la semilla con organismos beneficiosos para protegerla) y fisiológicos (hidratación de la semilla y otros) para la prevención de enfermedades. Los microorganismos utilizados en el bioacondicionamiento pueden ser bacterias u hongos, incluyendo diversas especies que pueden establecer una relación simbiótica con las raíces de las plantas. Los más conocidos son las rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal (Plant Growth-Promoting Rizobacteria, PGPR, por sus siglas en inglés). Durante el proceso, los microorganismos se aplican a la superficie de la semilla, donde luego colonizan las raíces y forman una barrera protectora contra patógenos. Las rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal incluyen una gran variedad de especies pertenecientes a los géneros: Agrobacterium, Arthrobacter, Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Burkholderia, Enterobacter, Klebsiella, Pseudomonas, Rhizobium, Serratia y Streptomyces. Su aplicación a las semillas mediante bioacondicionamiento mejora el rendimiento de las plantas bajo condiciones de estrés y, como resultado, incrementa el rendimiento de los cultivos tanto de forma directa como indirecta. Un grupo de cepas fúngicas del género Trichoderma spp. también se utiliza comúnmente en el bioacondicionamiento de semillas. Estos hongos viven en la rizosfera del suelo y colonizan las raíces de las plantas. Activan los sistemas de defensa de las raíces, provocando parasitismo y la producción de sustancias antibióticas, lo que finalmente regula las infecciones por patógenos y reduce la incidencia de enfermedades. Los antagonistas fúngicos más comúnmente utilizados en el bioacondicionamiento incluyen, principalmente, entre otros a: Ampelomyces quisqualis, Candida oleophila, Chaetomium globosum, Clonostachys rosea (sin. Gliocladium catenulatum), Paraphaeosphaeria minitans (sin. Coniothyrium minitans), Penicillium spp., Phlebiopsis gigantea (sin. Phlebia gigantea), Purpureocillium lilacinum (sin. Paecilomyces lilacinus), Talaromyces flavus, Teratosperma sclerotivorum (sin. Sporidesmium sclerotivorum), Trichoderma hamatum, T. harzianum, T. koningii, T. parceramosum (sin. T. atroviride), T. virens (sin. Gliocladium virens) y Verticillium lecani.

Reactor, recipiente o incubadora empleado para llevar a cabo una reacción biológica, como el cultivo a gran escala de células u órganos vegetales, microorganismos o hibridomas segregantes de anticuerpos monoclonales en medio líquido. En algunos casos pueden servir como biosensores.

Dispositivo o instrumento de análisis que utiliza un elemento biológico de reconocimiento (anticuerpo, ácido nucleico, célula, enzima, orgánulo, tejido, receptor, ribozima, entre otros), o nanomateriales, (como nanopartículas o nanocompuestos), materiales inteligentes o compuestos biomiméticos (aptámeros, polímeros), como catalizadores o biorreceptores, para detectar o determinar un compuesto químico. El catalizador se encuentra a menudo inmovilizado en un soporte sólido y se utiliza conjuntamente con un instrumento fisicoquímico. Este instrumento sigue la transformación química de la sustancia a analizar por medio del catalizador inmovilizado, y después lo traduce a una señal eléctrica (generalmente por electrodos redox, electrodos selectivos de iones, sensores térmicos, contadores de fotones o fluorímetros, entre otros). Constan básicamente de tres elementos: el biorreceptor o catalizador, el transductor y el procesador de señal. Primero la muestra se une específicamente al biorreceptor (generalmente en Fitopatología, anticuerpo monoclonal o recombinante, ácido nucleico, glucano, lectina, enzima, tejido, célula entera, etc.); la señal que se genera es convertida por el transductor en un impulso químico, óptico, eléctrico o de otro tipo, que sea medible, y la identificación cualitativa y cuantitativa es procesada para ser leída por el procesador de datos. Se han diseñado biosensores desarrollados para la detección de algunos patógenos de plantas, incluso para varios simultáneamente, pero no han alcanzado todavía su utilización a escala comercial.

Tipo de biosensor en el cual el catalizador o biorreceptor está inmovilizado con un instrumento de detección, como un electrodo enzimático (en el que el catalizador es un enzima) o un electrodo biosonda (en el que el catalizador suelen ser anticuerpos monoclonales específicos o células intactas).

Cámara frigorífica o de incubación de microorganismos o células con una atmósfera interna de composición gaseosa distinta a la del ambiente. Generalmente mantiene una proporción alta de dióxido de carbono y baja en oxígeno, con el fin de ralentizar los procesos respiratorios de los vegetales o frutas almacenadas en su interior, o para favorecer el crecimiento de organismos anaerobios con fines de cultivo de los mismos, o para el mantenimiento y cultivo de líneas de hibridomas productores de anticuerpos monoclonales.

Instrumento que poseen un fondo subdividido en 9 cuadrados grandes de 1 mm2 cada uno, que permite estimar con precisión el número de células o en suspensión en un medio líquido, mediante una fórmula en la que una de las variables es el número observado. El cálculo de la concentración de células se puede expresar así: partículas/μL = (partículas contadas) / [(superficie contada (mm²) x profundidad de la cámara (mm)] x dilución. Muy usual en la producción de anticuerpos monoclonales y para conteo de esporas.

Aquella sobre la que se cultivan los tipos celulares de difícil crecimiento aisladamente. Se utilizan células nodriza (epiteliales o timocitos) del timo de ratón en algunas fases de la producción de anticuerpos monoclonales cuando se clonan y cultivan pocas células del hibridoma de interés, así como otras células en cultivo de tejidos vegetales, también se utilizan en la producción y mantenimiento de protoplastos y en la regeneración de plantas in vitro.

La competencia celular se refiere a la capacidad de una célula para absorber ADN extraño (extracelular) de su entorno circundante. El proceso de captación genética se conoce como transformación. En algunos casos, el material genético absorbido por una célula puede incorporarse o recombinarse en su propio genoma. La competencia celular natural está determinada genéticamente, es decir, una bacteria está genéticamente predispuesta a tomar material genético libre (genéticamente competente) que existe en su entorno. Las células bacterianas competentes pueden tomar ADN de una variedad de fuentes; sin embargo, algunas bacterias muestran especificidad o preferencia por fragmentos de ADN que están sobrerrepresentados dentro de su genoma. Si bien una célula puede considerarse naturalmente competente, el estado de competencia no es necesariamente un estado constante. De hecho, la regulación natural de la competencia y la transformación es importante para proteger una célula. La regulación a menudo ocurre a través de señales ambientales y bioquímicas. Las células competentes artificiales o inducidas son aquellas que se han hecho competentes mediante manipulación eléctrica (electroporación) o química (cloruro de calcio), creando poros temporales en la membrana celular para que el ADN pase a través de estos. La competencia celular se ha convertido en una herramienta de investigación esencial para la clonación, porque proporciona un mecanismo para introducir nuevo material genético en una célula. Si bien hay muchas células competentes de origen natural, el organismo modelo Escherichia coli no es naturalmente competente, por lo que para utilizar estas células para la clonación se debe inducir la competencia.

La tumoral de crecimiento indefinido in vitro. Se emplea en la tecnología de hibridomas para la producción de anticuerpos monoclonales al ser fusionados con linfocitos de animales inmunizados. Las líneas comúnmente utilizadas en Patología vegetal proceden de ratón Balb/c.

1. La capaz de responder a un estímulo durante la inducción de un proceso morfogenético. 2. Cualquier célula en la que una hormona se une a su receptor, es objeto de transformación genética, constituye el inicio de un clon, o es objeto de atención y es seleccionada para realizar un experimento.

1. Veces que se ha secuenciado teóricamente un nucleótido de un inserto en la genoteca genómica. Cuanto mayor sea el número de fragmentos clonados de ADN que se secuencian, tanto mayor será la cobertura. 2. Cantidad de veces que un segmento genómico está representado en la genoteca. 3. (depth coverage). Número de veces que una porción del genoma es secuenciada en una reacción de secuenciación. Frecuentemente expresado como profundidad de lectura y numéricamente como 1X, 2X, 50X, 100X, etc. 4. Cantidad o porcentaje abarcado por una cosa o una actividad. 5. Extensión territorial (internacional, nacional, regional, municipal o local) que abarcan diversos servicios y competencias, especialmente los de Sanidad Vegetal y los de telecomunicaciones. 6. Conjunto de medios técnicos y humanos que hacen posible una información.

1. Situación que se genera cuando dos cepas de un organismo con diferentes mutaciones homocigóticas recesivas, que producen el mismo fenotipo mutante (por ejemplo, un cambio en la estructura del ala en las moscas), tienen descendencia que expresa el fenotipo de tipo silvestre cuando se aparean o cruzan. Se pueden realizar pruebas de complementación con eucariotas haploides como hongos, con bacterias y con virus como bacteriófagos. En el caso de procariotas, la complementación se evalúa mediante la introducción en la célula de un fragmento de ADN clonado. 2. Capacidad de los productos génicos de dos virus mutantes que no pueden reproducirse para interaccionar funcionalmente en la misma célula y permitir la reproducción de estos virus.

Plásmido al cual se le ha adicionado la secuencia cos del genoma del bacteriófago λ. La secuencia cos abarca unos 200 nt y permite el empaquetamiento del vector en una cápsida del fago. Son vectores de clonación, muy utilizados en la elaboración de genotecas de ADN genómico de gran tamaño ya que permiten la introducción de insertos de ADN de hasta 45 kb.

El de células individuales o agregados celulares de vegetales. Se efectúa en medio líquido en fermentadores con agitación para favorecer la aireación. Se suele utilizar también para el cultivo de ciertos microorganismos y de hibridomas para la producción de anticuerpos monoclonales en su sobrenadante.

El continuo en el que la entrada de medio líquido fresco se contrarresta con la salida del correspondiente volumen de medio agotado o sobrenadante con anticuerpos monoclonales y células. Las células vegetales, microorganismos o hibridomas se separan del medio que sale y se añaden de nuevo al sistema.

Técnica utilizada para obtener cultivos celulares puros. El cultivo se realiza mediante distribución de una capa delgada de células o gotas de un dislacerado de una muestra sospechosa de estar infectada por microorganismos sobre un medio de cultivo sólido. Cada colonia (microorganismos), clon (caso de hibridomas) o callo (caso de células vegetales) que se forme, debe proceder de una única célula, tras proliferar en un medio adecuado. En el caso de microorganismos, las colonias en medio sólido suelen poseer color, forma y tamaño característicos del microorganismo cultivado.

Aquel que contiene microorganismos o células exclusivamente de una misma cepa o clon.

Gas incoloro, inodoro, incombustible y asfixiante, más pesado que el aire. Se genera en combustiones y en algunas fermentaciones. Se utiliza como inhibidor de la respiración de los frutos conservados en cámaras frigoríficas de atmósfera controlada. También se usa en bolsas o jarras de anaerobiosis y estufas de dióxido de carbono para el cultivo de bacterias anaerobias y de hibridomas productores de anticuerpos monoclonales específicos. Es el principal causante del efecto invernadero y como consecuencia del calentamiento global de la Tierra.

Sistema agrario consistente en pasar de un monocultivo en la explotación a varios cultivos, con el objetivo de mejorar el aprovechamiento de recursos y disminuir el riesgo que una enfermedad afecte y cause daño económico al único cultivo genéticamente muy homogéneo o incluso clonal, mayoritario en la explotación.

Enzima de restricción proveniente de la bacteria modelo Escherichia coli que reconoce la secuencia G’AATTC (el apóstrofe señala el sitio de corte). Muy utilizada en manipulación genética ya que el vector de clonación pBR322 presenta un único sitio de rotura, que es precisamente reconocido por esta enzima, que fue una de las primeras en ser clonadas y producidas industrialmente.

Denominación común en español, que proviene del acrónimo del inglés “Enzyme-Linked Immunosorbent Assay”, o ensayo inmunoenzimático en fase sólida o ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas, popularmente ELISA. Da nombre a una técnica inmunológica o ensayo inmunoenzimático o serológico muy sensible para detectar, cuantificar, identificar o comparar antígenos complejos (agentes patógenos), proteínas, anticuerpos, péptidos u hormonas, incluso en extractos vegetales brutos. Esta prueba se caracteriza por utilizar un soporte insoluble o inmunoadsorbente (microplacas, tubos, pocillos o membranas) para fijar, tapizar o sensibilizar con antígenos o anticuerpos, según la modalidad de técnica. La prueba consiste en una serie de incubaciones mediadas por lavados, hasta adicionar el substrato. Se caracteriza porque la reacción se revela con anticuerpos conjugados enzimáticamente (frecuentemente en Patología vegetal con fosfatasa alcalina de mucosa intestinal de ternera y en ocasiones con peroxidasa de rábano picante) o biotinilados y un sustrato apropiado a la enzima marcadora (p-nitrofenil fosfato en el caso de la fosfatasa alcalina y peróxido de hidrógeno para la peroxidasa). La densidad óptica o valor ELISA final es proporcional a la cantidad de antígeno o anticuerpo detectado y permite asignar un valor numérico a la detección semicuantitativa. Se han diseñado distintas variantes o modalidades: ELISA directo, indirecto, de doble sándwich de anticuerpos (DAS), indirecto doble sándwich de anticuerpos (DASI), y competición. Las modalidades pueden realizarse con anticuerpos policlonales, con anticuerpos monoclonales, con anticuerpos recombinantes o con fragmentos F(ab´)2 de anticuerpo y proteína A conjugada. La técnica ELISA puede realizarse con sustratos solubles o precipitantes.

Variante de ELISA DAS (doble sándwich de anticuerpos) combinada con el sistema de revelado de ELISA indirecto. Se realizan los mismos pasos, pero requiere producir anticuerpos específicos en dos especies animales distintas. Se evita realizar conjugados al revelar la reacción con anticuerpos específicos (como los empleados en la fase primera de tapizado) y tras incubación y lavado se añaden inmunoglobulinas anti la especie animal utilizada para generar los anticuerpos específicos frente al patógeno de interés, pero conjugados, con una enzima. Se suele utilizar con anticuerpos policlonales de conejo en la fase de tapizado y anticuerpos monoclonales específicos de ratón, y revelar con inmunoglobulinas de cabra antirratón conjugadas con una enzima (normalmente fosfatasa alcalina). La modalidad es muy sensible (capaz de detectar del orden de 0,05-0,1 g de antígeno), pues permite amplificar la reacción con la adición de inmunoglobulinas anti especie marcadas.

Variante de ELISA muy sensible para detección de antígenos complejos (agentes patógenos). De manera secuencial y mediada por etapas de incubación y lavado, se tapizan los pocillos de una microplaca o la superficie de un inmunoadsorbente con anticuerpos purificados específicos del agente patógeno a detectar, se añade la muestra (extracto bruto vegetal, suspensión bacteriana, dilacerado, exudados, lloros de vid, extracto de suelo filtrado, etc.), y se añaden los mismos anticuerpos que en la primera etapa, pero conjugados con una enzima (habitualmente fosfatasa alcalina). La reacción se revela con el substrato específico de la enzima marcadora (habitualmente p-nitrofenil fosfato) que por hidrólisis y efecto batocrómico producirá un color amarillo (valor ELISA a 405 nm) de intensidad proporcional a la enzima retenida. La reacción clásica y más sensible, se realiza añadiendo 200 L/pocillo de la microplaca en cada etapa, aunque para ahorro de reactivos y economía algunos kits comerciales utilizan solo 100 L/pocillo. Otras modalidades utilizan únicamente unos microlitros Los anticuerpos utilizados para tapizar o como conjugados pueden ser producidos en la misma especie animal o no. Frecuentemente se utilizan anticuerpos policlonales para tapizado y monoclonales específicos (solos o en mezcla de varios) como conjugados, o ELISA basado completamente en anticuerpos policlonales, en anticuerpos monoclonales o recombinantes de anticuerpos monoclonales, que confieren alta especificidad y sensibilidad. DAS es la modalidad más popular de ELISA para detección de agentes patógenos o sus metabolitos.

Variante de ELISA usada para detectar antígenos, establecer parentescos serológicos entre ellos o titular anticuerpos en diluciones seriadas. Sobre una microplaca o un inmunoadsorbente tapizado con antígeno (o muestra en la que desea verificar la presencia del antígeno de interés), se añaden los anticuerpos específicos del antígeno y tras incubación y lavado se añaden inmunoglobulinas anti la especie animal utilizada para obtener los anticuerpos específicos, marcadas con una enzima o biotiniladas Esta modalidad evita tener que preparar conjugados para cada anticuerpo específico y como quiera que las inmunoglobulinas anti especie son muy utilizadas en análisis clínicos, están disponibles comercialmente con una alta calidad contrastada. Las más usuales son las de cabra anticonejo para anticuerpos policlonales de antisueros o de cabra antirratón para anticuerpos monoclonales, marcadas con fosfatasa alcalina o peroxidasa.

Proceso de enriquecimiento semiselectivo o selectivo en la misma microplaca ELISA tapizada con anticuerpos policlonales en la que directamente se realizará la detección serológica con anticuerpos monoclonales específicos, normalmente mediante ELISA DASI. También se puede realizar mediante ELISA directo o indirecto, utilizando microplacas no sensibilizadas, no tapizadas con anticuerpos.